磷酸钙法细胞转染试剂盒保存条件

磷酸钙法细胞转染试剂盒操作流程：
贴壁细胞转染：  
1、 在转染前24h用胰蛋白酶消化培养细胞，取适量对数期细胞转移至新的培养器皿中， 待细胞密度大70～80%满时即可进行转染。后续操作步骤均按6孔板计算，如果转染器皿不同，请按比例自行调节用量。  
2、 在加入DNA之前2～4h，加入2ml不含抗生素的完全培养液，置于37℃ 5% CO2培 养箱培养。
 3、 取DNA(体积不宜超过20μl)加入100μl Calcium chloride solution，混匀，即为 DNA-CaCl2溶液。  
4、 取BBS solution 100μl，用移液器一边吹打BBS solution，一边逐滴加入DNA-CaCl2 溶液(操作缓慢，一般在1～2min)。
 5、 室温静置20～30min，即为DNA-CaCl2-BBS溶液，此时可能出现极其微小颗粒沉淀。
6、 取DNA-CaCl2-BBS溶液底部物质均匀加入到6孔板细胞中，轻轻晃动混匀。
7、 置于37℃ 5% CO2培养箱培养。  
8、 去除培养液，用PBS清洗细胞2次，加入2ml完全培养液继续培养，一般24h后可见 转染细胞的表达。

悬浮细胞转染：  
1、 低速离心收集悬浮细胞，用PBS洗涤1次。  
2、 取DNA(体积不宜超过20μl)加Calcium chloride solution，混匀，即为DNA-CaCl2 溶液。