TMK缓冲液(pH7.6)说明:生物的基本功能单位是细胞。为了研究细胞器的构造和机能,需要对其采用恰当的方法进行分离、纯化,从而获得较高质量的细胞器。动物细胞破碎后,低速离心去除核及线粒体等较大颗粒后,再以较大离心力获得微粒体,其中大部分为内质网。Leagene TMK缓冲液(pH7.6)主要由Tris-HCl、氯化镁、氯化钾组成,简称为TMK buffer,主要用于分离内质网。
TMK缓冲液(pH7.6)操作流程:1、分别用TMK缓冲液(pH7.6)配制0.88mol/L蔗糖溶液、1.3mol/L蔗糖溶液、2mol/L蔗糖溶液。
2、将分离好的微粒体沉淀重悬于10倍体积的0.88mol/L蔗糖溶液。
3、取一超速离心管,按2:2:7的比例依次轻轻加入2mol/L蔗糖溶液、1.3mol/L蔗糖溶液、含有微粒体沉淀的0.88mol/L蔗糖溶液。
4、离心4h。样品溶液与1.3mol/L蔗糖溶液之间为滑面内质网,1.3mol/L与2mol/L蔗糖溶液之间为粗面内质网,沉淀为游离性核糖体。
5、滑面内质网与滑面内质网分别用TMK缓冲液(pH7.6)稀释离心。
1.购买后,请务必确认标签上的注意事项。
2.做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制。
3.在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。
4.对没有标明其危险特性?有害特性的,也要慎重地进行操作。
5.必须戴好防护用具,小心翼翼进行操作。
6.请参照相关法规,文献,MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性。再进行安全操作。
7.通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话,要更加注意其保管和管理。
8如果试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。
9.对于使用后的废弃物,不要或旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。
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TMK缓冲液(pH7.6)制备方法:
11.为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液。
2.以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法。对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法。
3.缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2+ 离子时,可用下面的反应:
4.白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应。
TMK缓冲液(pH7.6)使用常识:
1.试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
2.要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
3.试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
4.已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。TMK缓冲液(pH7.6)相关产品如下:
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