hmgb1 ELISA试剂盒说明书

hmgb1  ELISA试剂盒
实验操作步骤如下：
1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2、加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7、温育：操作同3。

8、洗涤：操作同5。

9、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值），测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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温馨提示：不可用于临床治疗。