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AIRA,大鼠抗胰岛素受体抗体ELISA试剂盒原理

AIRA,大鼠抗胰岛素受体抗体ELISA试剂盒原理

  • 价 格: 电议
  • 型号:
  • 生 产 地:美洲
  • 访问:12次
  • 发布日期:2017/12/7(更新日期:2019/1/15)

恒远免疫学第三方检测中心

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AIRA,大鼠抗胰岛素受体抗体ELISA试剂盒原理用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠抗胰岛素受体抗体(AIRA)的含量。
  • 详细内容
  • 公司简介
 AIRA,大鼠抗胰岛素受体抗体ELISA试剂盒原理
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠抗胰岛素受体抗体(AIRA)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠抗胰岛素受体抗体(AIRA)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠抗胰岛素受体抗体(AIRA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 AIRA,大鼠抗胰岛素受体抗体ELISA试剂盒原理操作流程
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。

注意事项
1.试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2.加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3.孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最后的酶标仪读数。
5.试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请精确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。

AIRA,大鼠抗胰岛素受体抗体ELISA试剂盒原理
公司常见产品:
人常见ELISA试剂盒系列
人:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等
大鼠常见ELISA试剂盒系列
大鼠:TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等
小鼠常见ELISA试剂盒系列
小鼠:IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等
另有兔、猪、猴、鸡、鸭、羊、植物等多种种属ELISA试剂盒,所有试剂盒经过充分验证,保证有效且重复性佳。

       恒远免疫学第三方检测中心隶属上海恒远生物科技有限公司。于2010年成立,是一家生物技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发及销售。主要产品有进口BIM/RD/TSZ ELISA试剂盒、放免试剂盒、血清、抗体、生物科研试剂、实验耗材等。公司目旗下有员工500余人,ELISA试剂盒年100万盒,年销售额近2亿元。
公司自成立以来,就非常注重企业信息化的建设,我们采用了先进的内部供应链信息处理平台,保证客户订单的准确、高效处理。我们的客户关系管理系统和客户关系管理团队,能第一时间响应客户的售、售后需求,关注客户体验及满意度。我们拥有上百名业的技术人员,为您提供业、耐心的服务。我们业,所以值得信赖;我们注,所以我们高速发展;我们信奉“客户至上”,我们坚持“诚信创新,合作共赢”;我们将竭尽所能,为您提供便捷、业的采购服务,节省您的时间和成本。 我们坚信,经过我们的不懈努力,上海恒远生物科技有限公司将成为“生命科学及化学域业、规模大、品种全及配套服务完善的业供应商”,为用户在生化科学域提供“一站式”服务,成为这个行业的dao者。

企业文化
上海恒远生物科技有限公司企业文化
企业口号
诚信创新,合作共赢
企业愿景
严格的质控体系,建立和完善企业制度,创造性发展,成为一家科研服务行业航者。
企业使命
为客户:创造至精至诚的优质产品与服务
为员工:创造公平并富创造性的成长空间
为社会:提供业先进的检测机构
企业核心价值观
业、诚实、守信、创新
经营理念
承诺、卓越、共赢、发展、感恩
人才理念
以人为本、唯才善用
恒远奉行“以人为本、唯才善用”,提倡“人是核心资本”,公平合理并创造性地使用人才,尽可能的给员工提供足够的舞台去发挥去成长。公司尊重人,尊重每一位员工的个性,尊重员工的个人愿望,尊重员工的选择权利。依托这样的人才观。恒远将进一步完善科学合理的人力资源管理机制,造就一个良好的人才成长空间。

 
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