酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(麝香草酚酞比色法)产品用途:1.用于检测血清中前列腺酸性磷酸酶活性。
2.可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性。
3.100T该试剂盒可检测约50次样本。
酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(麝香草酚酞比色法)操作流程: 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120pmol/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
60pmol/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
30pmol/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
15pmol/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
7.5pmol/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(麝香草酚酞比色法)说明注意事项:1.待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
2. 建议每次测定时都做标准曲线,以使标准更准确,另外标准品需避免反复冻融。
3.如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑根据比色杯的最小检 测体积,尽量采用小体积的比色杯。
4.所测样本的值高于标准曲线的上限,应用ACP Assay buffer稀释样品后重新测定。
5.一支显色工作液配制后需当日使用完毕,因此请注意适当多准备一些样品一起检测。
6.p-nitrophenol溶液对人体有害,反应终止液有腐蚀性,请小心操作。
7.如果希望进行酶活性的绝对定量,进行酶反应时应精确计时,此时推荐采用孵育30min 或更长时间,以减小操作过程中的时间误差。
8.待测样品中酸性磷酸酶活性较低时,可适当延长孵育时间至30min。
9.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(麝香草酚酞比色法)说明相关产品如下:
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