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PEMT,大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶ELISA试剂盒

PEMT,大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶ELISA试剂盒

  • 价 格: 电议
  • 型号:
  • 生 产 地:中国大陆
  • 访问:2次
  • 发布日期:2017/12/14(更新日期:2019/1/16)

恒远免疫学第三方检测中心

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PEMT,大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶(PEMT)的含量。
  • 详细内容
  • 公司简介
      
PEMT,大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶ELISA试剂盒
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶(PEMT)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶(PEMT)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶(PEMT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

PEMT,大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶ELISA试剂盒实验材料与试剂配制
1.仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 洗液的配制:按1:30的比例配制洗液备用。

样品收集、处理及保存
1).细胞培养上清:
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:
用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:
在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:
包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:
切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作步骤
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的30分钟内,以免影响准确性。

数据计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,即为样品的实际浓度。

注意事项
1)实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2)加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性。
3)孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
4)建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
5)建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。

保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃
2.有效期:6个月

PEMT,大鼠磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶ELISA试剂盒订货说明
1)卖方确保所订产品与目录技术指标保持一致;
2)为了确保买方产品在运输中的质量,对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。
3)收到货物后如出现质量问题,买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。买方逾期不提出异议,视为货物符合其要求,卖方不付任何责任。
4)出现质量以外的问题,如破损等,买方应在收货后一个周内提出。买方未按时提出异议,视为该产品合格。
本公司对所有售出的产品保证质量,并提供良好的售后服务,有关产品质量的投诉,请在收到货物的32天内以书面形式提出,并向我公司技术人员提供相应的材料,我们会及时派人解决。所有形式的赔偿或退换仅限于产品本身,不涉及其他间接内容。凡购买本公司任意款elisa试剂盒,均可享受免费代测服务,并提供技术指导。


       恒远免疫学第三方检测中心隶属上海恒远生物科技有限公司。于2010年成立,是一家生物技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发及销售。主要产品有进口BIM/RD/TSZ ELISA试剂盒、放免试剂盒、血清、抗体、生物科研试剂、实验耗材等。公司目旗下有员工500余人,ELISA试剂盒年100万盒,年销售额近2亿元。
公司自成立以来,就非常注重企业信息化的建设,我们采用了先进的内部供应链信息处理平台,保证客户订单的准确、高效处理。我们的客户关系管理系统和客户关系管理团队,能第一时间响应客户的售、售后需求,关注客户体验及满意度。我们拥有上百名业的技术人员,为您提供业、耐心的服务。我们业,所以值得信赖;我们注,所以我们高速发展;我们信奉“客户至上”,我们坚持“诚信创新,合作共赢”;我们将竭尽所能,为您提供便捷、业的采购服务,节省您的时间和成本。 我们坚信,经过我们的不懈努力,上海恒远生物科技有限公司将成为“生命科学及化学域业、规模大、品种全及配套服务完善的业供应商”,为用户在生化科学域提供“一站式”服务,成为这个行业的dao者。

企业文化
上海恒远生物科技有限公司企业文化
企业口号
诚信创新,合作共赢
企业愿景
严格的质控体系,建立和完善企业制度,创造性发展,成为一家科研服务行业航者。
企业使命
为客户:创造至精至诚的优质产品与服务
为员工:创造公平并富创造性的成长空间
为社会:提供业先进的检测机构
企业核心价值观
业、诚实、守信、创新
经营理念
承诺、卓越、共赢、发展、感恩
人才理念
以人为本、唯才善用
恒远奉行“以人为本、唯才善用”,提倡“人是核心资本”,公平合理并创造性地使用人才,尽可能的给员工提供足够的舞台去发挥去成长。公司尊重人,尊重每一位员工的个性,尊重员工的个人愿望,尊重员工的选择权利。依托这样的人才观。恒远将进一步完善科学合理的人力资源管理机制,造就一个良好的人才成长空间。

 
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