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英文名称:EZ Mouse DNA Direct PCR Kit
产品规格:50T/200T
产品价格:420/1350元
试剂盒应用:转基因小鼠、基因缺失小鼠鉴定。
试剂盒组成:MuDNA-EZ-1、MuDNA-EZ-2、MuDNA-EZ-3、2×TaqMix、H2O
保存条件:-20ºC保存。使用前将MuDNA-EZ-1、MuDNA-EZ-3在室温或37ºC充分溶解。MuDNA-EZ-2、2×TaqMix使用时需置于冰上。
使用方法:
(1)将MuDNA-EZ-1和MuDNA-EZ-2以25:1的比例混合均匀,并分装每管26µL。
(2)剪取小鼠尾巴1-3毫米,完全浸入上述溶液中。
(3)置于50ºC加热30分钟。
(4)置于95ºC加热10分钟。
(5)加入50µL MuDNA-EZ-3。
(4)取上述处理液进行PCR扩增。
推荐的PCR加样体系
成分 | 总20 μL体系 |
2×TaqMix | 10 μL |
上游引物(10 μM) | 1 μL |
下游引物(10 μM) | 1 μL |
模板DNA | 2 μL |
H2O | 6 μL |
PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 oC | 5 min |
|
变性 | 94 oC | 30 s |
30-35 |
退火 | 50~72 oC | 30 s | |
延伸 | 72 oC | 1 kb/min | |
最终延伸 | 72 oC | 10 min |
|
| 4 oC | Hold |
|
(1)剪取不同小鼠尾巴时,应当更换剪刀,用过的剪刀经过84消毒液浸泡和净水清洗后再使用。
(2)应当设置野生型小鼠的对照。
(3)PCR的退火温度可根据引物的预测Tm值减去5ºC,或者通过梯度PCR摸索较佳退火温度。
(4)TaqMix中加入了染料和相应试剂,PCR后可直接进行电泳,无需另加Loading buffer。
PCR前的核酸提取过程操作复杂,耗时、好礼,难以实现高通量操作,且易造成实验室气溶胶污染。本公司给予独特的Direct Lysis试剂,开发了组织细胞直接扩增技术,可不用提取核酸,对组织或细胞样本简单处理后,直接进行PCR、RT-PCR、qPCR以及RT-PCR。该系列试剂盒可广泛应用于基因克隆、转基因或基因敲除鉴定、基因表达分析、病毒诊断等PCR相关的各种实验。
产品优势:
低样本量:样品用量小,20-40ul即可满足需求
快捷:30min内制备模板,无需其他设备
高效:经反复验证,可有效扩增组织细胞中长达1800bp的DNA和RNA的片段
直接:无需柱纯化、步骤简单,降低气溶胶产生
高通量:能够在96孔板或8联管中操作
RNA direct:RNA也可进行直接扩增,同类产品少,且对比竞品效果优
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