γδT细胞高效扩增试剂盒

γδT细胞具有在体内快速反应的特性，在受到刺激时，会先于αβ-T细胞释放促炎性细胞因子（IFN-γ和TNF-α等）。  γδT细胞能够激活NK细胞的肿瘤细胞毒作用，与DC细胞互刺激成熟， APC细胞抗原呈递的功能，激活αβ-T 细胞的免疫效应， γδT细胞的杀伤作用具有非MHC限制性，广泛的杀瘤谱，已知对至少十几种肿瘤细胞有杀伤作用。 γδT细胞在人外周血含量很少（1-5%），本产品能够将外周血中的单个核细胞大规模扩增成γδT细胞，具有扩增效率高，目的细胞百分比高的特点，起始单个核细胞经过14天培养，总细胞数可以扩增约50-100倍左右，γδT细胞数可以扩增500-1000倍，其纯度高于85%，并且全程无血清培养，为基础和临床研究使用γδT细胞提供 一个有力的武器。

产品特点

1 扩增效率高：起始单个核细胞经过14天培养，总细胞可以扩增约50-100倍左右，目的细胞（γδT细胞）数可以扩增500-1000倍；

2 目的细胞百分比高： γδT细胞纯度可以达到85%以上；

3 全程无血清培养。 

试剂盒成份

使用说明

1 在血液采集前一天将100μL GD-I试剂加入4mL PBS，包被于T-75瓶，用锡纸包好，平放于4°C冰箱过夜；

注意： 确保T-175瓶平放以保证含有GD-I试剂的PBS溶液能够均匀分布于T-75瓶底。

2 D0 用PBS溶液洗涤前一天包被的T-75瓶一次，将制备好的单个核细胞（MNC）按0.5-1M/mL细胞密度铺于洗涤后的T-75瓶中，加入GD-IV 47.5mL， GD-II 85μL，GD-III 2.5mL以及IL-2 1000U/mL；

注意：1）洗涤时用移液管吸取20ml PBS注入T-75瓶，轻微震荡后倒出/吸出，切忌用冲力较大的移液器或移液枪反复冲洗以免破坏包被面；

2）本试剂盒所配试剂均为整支加入，可先用移液枪移取试剂管中试剂后再用培养基冲洗试剂管确保管内剩余试剂能够充分利用。

 3）D3 补加90mL GD-IV（含IL-2 1000U/mL）和10mL GD-III，转入细胞培养袋，此时袋子含150mL培养基；

4 ）D5 往培养袋补加135mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和15mL GD-III，此时袋子含300mL培养液；

5 ）D7 往培养袋补加270mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和30mL GD-III，此时袋子含600mL培养液；

 6 ）D9 每个培养袋补加460mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和40mL GD-III，此时袋子含1100mL培养液；

注意： 确保T-175瓶平放以保证含有GD-I试剂的PBS溶液能够均匀分布于T-75瓶底。

 7 ）D12-14 收获γδT细胞。

培养效果

培养细胞14天后，细胞总数及目的细胞（γδ T cell）扩增倍数以及流式表型分析（N=4）

产品保存

1 本产品需避光保存；

2 GD-I，GD-IV置于2-8°C保存，有效期为12个月，其它成份包括GD-II, GD-III置于-20°C保存，有效期为24个月；

3 请于保质期内使用本产品，超过保质期，请勿使用；

4 为确保本产品的质量，请避免对其反复冻融。