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对比方法
传统方法 | 样品均质仪 | |
样品处理 | 1.液氮研磨:处理不同样品需要更换研钵,操作存在危险性 2.样品逐个研磨,耗时耗力 3.研磨过程中易产生交叉污染 | 1.无需液氮处理,仅需将样品切块放入研磨管,机器自动研磨 2.同时处理多个样品,操作更简单 3.单样品单操作,避免交叉污染4.将样品放入研磨管后,建议将研磨管在低温中(-40℃以下)保存12小时后,再取出均质,这样使均质效果更佳 |
研磨效果 | 存在操作差异,研磨效果不一致 | 同时处理多个样品,均一性好 |
应用范围
适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的均质裂解
适用于各种动物组织包括大脑、脏器、肌肉、骨骼、腺体等样品的均质裂解
适用于真菌、细菌等样品的均质裂解
适用于食品、药品成分分析实验的研磨破碎
适用于孢子、毛发、粪便、土壤等样品的研磨破碎
-----RT-PCR和基因差异显示技术
-----Northern杂交、qPCR和基因芯片
-----文库合成和Southern杂交
-----食品安全检验
-----重组蛋白表达优化
-----环境调查
样品管托架
24×2.0ml样品管托架/12×5.0ml样品管托盘24×2.0ml样品管托架12×5.0ml样品管托架
12×5.0ml样品管托架 24×2.0ml样品管托架
Bioprep-24R提取结果
动物组织提取结果
(注:M1为10kb marker ;M2为1000kb marker;泳道1和泳道2为常温均质;泳道3和泳道4为冷冻均质,直接冻存至0℃均质;泳道5和泳道6为冷冻均质,至0℃后放置5min均质)
样本编号 | 260nm | 280nm | 260/280 | C:ng/ul |
1 | 3.872 | 1.963 | 1.972 | 154.874 |
2 | 4.219 | 2.073 | 2.035 | 168.772 |
3 | 16.65 | 8.177 | 2.036 | 655.989 |
4 | 20.379 | 10.15 | 2.008 | 815.151 |
5 | 17.433 | 8.741 | 1.994 | 697.308 |
6 | 13.726 | 6.792 | 2.021 | 549.059 |
对照测得的RNA浓度以及电泳图,可以分析得出,冷冻均质仪提取RNA的效果较常温均质仪提取效果好,同时两种冷冻均质后提取的RNA浓度大体相同,但是根据电泳图表明,直接冻存至0℃均质提取的RNA在质量上优于降到0℃后放置5min均质,RNA降解较少
植物组织提取结果
(注:M1为1000bp marker ;泳道1为液氮处理的菜叶;泳道2为冷冻均质仪处理的菜叶;泳道3为液氮处理的水稻;泳道4为冷冻均质仪处理的水稻;泳道5为液氮处理的玉米叶;泳道6为冷冻均质仪处理的玉米叶 )
样品编号 | 260nm | 280nm | 260/280 | C:ng/ul |
1(液氮) | 26.371 | 16.177 | 1.63 | 1054.852 |
2(冷冻) | 20.668 | 12.285 | 1.68 | 826.79 |
3(液氮) | 2.143 | 1.24 | 1.73 | 85.741 |
4(冷冻) | 2.014 | 1.1058 | 1.82 | 80.6227 |
5(液氮) | 1.911 | 1.114 | 1.72 | 76.447 |
6(冷冻) | 1.898 | 1.045 | 1.82 | 75.9924 |
对照测得的RNA浓度以及电泳图,可以分析得出,冷冻均质仪提取植物组织RNA的效果与液氮研磨相当,但对于有些样品,特别是偏软的样品,冷冻均质的效果要略差于液氮研磨,这主要与液氮浸泡后样品更脆,研磨更彻底有关
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