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蛋白定量即蛋白质定量,蛋白质定量根据其目的可分为全蛋白质的"总定量法"和特定蛋白质的"个别定量法"。 蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。
蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科员常涉及的分析内容。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,是经常进行的一项非常重要的工作。蛋白质是一种十分重要的生物大分子,它的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这样就给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法带来了许多具体的因难。
现测定蛋白质含量方法有很多。
① 根据物理性质:紫外分光光度法
② 根据化学性质:凯氏定氮法、双缩脲法、Folin-酚试剂法(Lowry法)、BCA法、胶体金法。
③ 根据染色性质:考马斯亮蓝染色法、银染法。
④ 根据其他性质:荧光法。
蛋白定量分析也就涉及到生产科研的多个领域及行业,也是生物学科、食品检验及掺假掺伪、临床检验、诊断疾病和质量检验中最常见的方法。
蛋白定量的测试方法有很多种,其中较为常见的有五种,分别是Bradford法、Bradford斑点试验、Coomassie 斑点试验、紫外分光度检测法及BCA法这五种。当然,每种方法适用的情况都有所不同。
今天说说蛋白质定量试剂盒(Bradford法)。
Bradford法
该方法用于大多数蛋白质定量是相当精确的,特别是用于小分子多肽定量。如核糖核酸酶或溶菌酶等。但是,去污剂的浓度超过0.2%则影响定量结果。如TritonX-100,SDS,NP-40等。
Bradford实验原理:考马斯亮蓝G250,在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量。
Abbkine的Bradford法蛋白质定量试剂盒#KTD3002 提供了一种简单快速的方法,来测定样品中的蛋白质浓度
Bradford法蛋白质定量试剂盒特点:
1.节省时间—显色反应迅速
2.兼容性好—不受大多数化学物质的影响。对于样品中巯基乙醇和二硫苏糖醇的兼容浓度,分别可达1mM和5mM。
3.良好的检测范围—检测范围为50 - 1000ug/ml。
Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域,致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品,从免疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户最喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业!
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ProSci 艾美捷 CTLA4抗体:蛋白质进行天然翻译后修饰
CTLA4抗体与使用酵母或细菌中制造的蛋白质开发的抗体不同,是使用哺乳动物细胞系中表达的抗原开发的,对蛋白质进行天然的翻译后修饰。
Rockland除了常规的Protein A和Protein G树脂外,还有特异性针对于多种常见种属比如说不同种属的IgG抗体纯化树脂。
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