大鼠列腺素E2ELISA试剂盒价格

 

 

产品名称：大鼠列腺素E2 ELISA试剂盒
ELISA试剂盒检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法
样品收集、处理及保存方法
1、血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5、保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
ELISA试剂盒 的准备
1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
1600 ng/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
800 ng/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
400 ng/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
200 ng/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 ng/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 ng/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 ng/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
大鼠ELISA试剂盒 操作步骤
1．使用，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加次。
5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9．在450nm波长处测定各孔的OD值。