艾美捷氧化氮荧光检测试剂盒重组方案

氧化氮（NO）在神经传递、血管调节、免疫等方面起着重要作用反应与细胞凋亡。由于NO迅速转化为亚硝酸盐（NO2-)以及硝酸盐(NO3)-),亚硝酸盐和硝酸盐的总浓度用作NO的定量测量生产。

艾美捷 BioVision 氧化氮荧光检测试剂盒可提供准确、可靠的检测结果在个简单的两步过程中方便地测量总硝酸盐/亚硝酸盐浓度。

在步中，硝酸盐通过硝酸还原酶转化为亚硝酸盐。第二步，亚硝酸盐与荧光探针DAN（2，3-二氨基萘）反应。NaOH提高了反应速率荧光产率。荧光强度与总氧化氮生成量成正比。使用培养基、血浆和组织匀浆对试剂盒进行了测试。

计算方法：

1.绘制标准曲线：绘制荧光与硝酸微微摩尔。

2.测定样品硝酸盐和亚硝酸盐浓度：

图：在硝酸还原酶存在和不存在的情况下进行亚硝酸盐、硝酸盐测定。分析结果如下：根据试剂盒方案，在步骤5将硝酸盐转化为亚硝酸盐1小时。

氧化氮荧光检测试剂盒重组：

1、分析缓冲液：分析缓冲液可随时使用。在4°C下储存。

2、酶辅因子：与110μl dH2O重组，制成10 mM储备溶液。等分并在-20°C下储存。冷冻/解冻时间应限制为1次。适当稀释部分10X，以制备1 mM工作溶液。使用时请保持在冰上。工作溶液可在4℃下储存6-8小时。

3、增强子：用1.2毫升的分析缓冲液重组。在使用过程中保持冰上状态。储存在-20摄氏度。

4、硝酸还原酶：用1.2毫升分析缓冲液重新组合。等分所需数量并储存在-20°C下。使用过程中请保持在冰上。冷冻/解冻时间应限制为1次。

5、硝酸盐/亚硝酸盐标准品：用1.0 ml分析缓冲液重新配制，旋涡产生每个标准10毫米。不使用时，在4°C下保存（不要冷冻！）。重组的标准品在4°C下储存4个月后稳定。

6、DAN探针和氢氧化钠：随时可用。在4°C下储存。

相关研究工具：

1.氧化氮比色分析试剂盒

2.谷胱甘肽荧光和比色检测试剂盒

3.乳酸、丙酮酸、NADH/NAD、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖分析试剂盒。