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l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠谷氨酸脱羧酶65(GAD65)的含量。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用双抗体步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠谷氨酸脱羧酶65(GAD65)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠谷氨酸脱羧酶65(GAD65)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
二、GAD65,国产大鼠谷氨酸脱羧酶65elisa试剂盒价格操作步骤
()样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
(二)检验方法
1.使用将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
三、GAD65,国产大鼠谷氨酸脱羧酶65elisa试剂盒价格注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
四、ELISA试剂盒优点:
我司共有14000余种ELISA试剂盒物种涵盖Human,Mouse,Rat等,品种具备以下优点:
高品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础
精确特异—特异检测目标分子,结果精确可重复
高度灵敏—可检测到pg/mL别的目标
种类齐全—可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属
优化设计—可拆卸式96孔板(12X8),为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行优化
五、问题解答
Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照解析
Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照:阴、阳性对照若有正确的结果,对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断。
空白对照:对ELISA试剂来说,空白对照实际上是不加标本不加酶做对照。空白对照主要测系统的吸光率。空白对照在单波长测量时显得尤其重要
我司代理几千种ELISA试剂盒,数万种抗体,并代理产品近万种,涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个域。为了节省您的时间,我们还可以提供代检测服务。
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