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染料法猪支原体实时定量PCR试剂盒
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma suis
货号:Mqs-sui-20 规格:20个反应
货号:Mqs-sui-50 规格:50个反应
货号:Mqs-sui-100 规格:100个反应
储存:-20度,避光保存,有效期年。避免反复冻融。
试剂盒特点:
1, 特异性检测猪支原体,准备样品时需注意避免混入牛血制品。
2, 使用热启动的Taq酶,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
3, 带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性,以及验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。
4, 带有ROX参比染料,帮助校正加样误差和管间差异。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
常见的寄生于猪的支原体有如下几种:猪支原体(Mycoplasma suis),猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae),絮状支原体(Mycoplasma flocculare),猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)和猪滑液支原体(Mycoplasma Hyosynoviae)。猪支原体寄生于血液,在分类上属于嗜血支原体。
嗜血支原体(Hemotropic Mycoplasma,或hemoplasma)是类寄生于红细胞表面的细菌,无细胞壁,具多形性,可通过血液传播,曾被命名为血巴通氏体(Hemobartonella)和附红细胞体(Eperythrozoon),根据16S rRNA基因序列分析,被重新归类为支原体。在猪体内已发现的嗜血支原体有三种:猪支原体、小支原体(Mycoplasma parvum)和Candidatus Mycoplasma haemosuis。
猪支原体旧称猪附红细胞体(Eperythrozoon suis),早报道于1932年,呈杆状,具多形性,是猪附红细胞体病的病原体。猪感染后症状表现多样,急性发作时,母猪表现出贫血、黄疸和厌食等症状1-3天,同时可能伴随发烧和产奶量下降,以及母性行为异常;仔猪则表现为严重贫血和发烧。急性发作后进入慢性感染阶段,此时表现为生长缓慢、易患病、繁殖能力下降。有实验表明,猪支原体和母猪的生殖问题直接相关。
猪支原体尚无合适的体外培养方法,检测方法般采用吉姆萨染色的血涂片法。血涂片法的检测灵敏度和特异性均比较差,容易受到制片方法和血液里其他成分的干扰。在急性发作期,此时菌体尚不明显,需病程进步发展才能检测。血清学方法由于难以获得足够的抗原,所以很少得到应用。而使用PCR法检测则更为方便,且灵敏度更高,检测时间短,仅需几个小时即可获得结果。
本试剂盒采用SYBR法实时定量PCR,针对16S rRNA基因设计特异性引物,可准确识别猪支原体,仅与维容氏支原体基因组有弱交叉反应。维容氏支原体寄生于牛血中,在准备样品时需注意避免混入牛血制品。用120只猪的血样进行测试,猪支原体的阳性率为7.5%。可见本试剂盒可用于猪支原体的检测和鉴定。
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