探针法Candidatus Mycoplasma haemolamae实时定量PCR试剂盒

探针法Candidatus Mycoplasma haemolamae实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Candidatus Mycoplasma haemolamae

货号：Mqt-hla-20      规格：20个反应

货号：Mqt-hla-50      规格：50个反应

货号：Mqt-hla-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，有效期年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1， 特异性检测Candidatus Mycoplasma haemolamae，与其他生物基因组无交叉反应。

2， 灵敏度高，反应液中仅1个基因组时检出率为90%。线性范围跨越8个数量。

3， 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4， 带有阳性对照样品（组分C），可用于检验试剂盒有效性。

5， 带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

嗜血支原体（Hemotropic Mycoplasma，或hemoplasma)是类寄生于红细胞表面的细菌，无细胞壁，可以感染很多哺乳动物，包括猫、犬、猪、牛、羊等，也包括人类。嗜血支原体曾被命名为血巴通氏体（Hemobartonella）和附红细胞体（Eperythrozoon），根据16S rRNA基因序列分析，被重新归类为支原体。Candidatus Mycoplasma haemolamae寄生于南美骆驼血液中，早报道于1990年。受宿主状况影响，其感染后临床表现多样，可表现为无症状，或慢性体重下降、抑郁、繁殖力下降、昏睡、急性衰竭，少数情况下出现死亡。合适用药可改善动物临床状况，降低细菌载量，但是可能无法彻底清除而后形成无症状带菌者。

Candidatus Mycoplasma haemolamae尚无合适的体外培养方法，因此难以开发蛋白类检测方法。检测方法般采用吉姆萨染色的血涂片法。血涂片法的检测灵敏度和特异性均比较差，容易受到人工制片方法和血液里其他成分（如：Howell–Jolly体）的干扰，且支原体易从红细胞表面脱落，造成漏检。而PCR法在灵敏度上则有明显的优势，且可以区分支原体种类。定量PCR法与普通PCR法相比，不仅可以精确定量，而且操作更为方便，更少受环境污染的影响。

本试剂盒基于16S rRNA基因设计特异性引物和探针，可以准确识别Candidatus Mycoplasma haemolamae，与其他生物基因组无交叉反应。经检测，本试剂盒与猫、犬、牛、猪和鼠的9种嗜血支原体，以及4种非嗜血支原体，均无交叉反应。本试剂盒可用于特异性检测Candidatus Mycoplasma haemolamae。

本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP（以dUTP代替dTTP）、引物、探针、阳性对照品、ROX染料，和用以防止残余DNA污染的UDG（Uracil- DNA Glycosylase，尿嘧啶-DNA-糖基酶），用户只需准备好DNA样品即可使用。

本试剂盒采用的DNA聚合酶源自端嗜热菌（Thermus thermophilus），经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体，在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段，抗体受热被去除，此时DNA聚合酶活性恢复，因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染，提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。

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