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探针法鹦鹉热衣原体族实时定量PCR试剂盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Chlamydia psittaci cluster
货号:Cqt-psi-20 规格:20个反应
货号:Cqt-psi -50 规格:50个反应
货号:Cqt-psi -100 规格:100个反应
储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点:
1, 特异性检测鹦鹉热衣原体,与其他生物基因组无交叉反应。
2, 灵敏度高,最低检测极限约为80个拷贝/反应。
3, DNA聚合酶采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci),或称鹦鹉热嗜衣原体/鹦鹉热亲衣原体(Chlamydophila psittaci)、鹦鹉衣原体,是一种严格细胞内寄生的原核生物,属于衣原体科(Chlamydiaceae)。鹦鹉热衣原体是最早发现的衣原体,宿主非常广泛,不仅有包括鹦鹉在内的多种鸟类,还有许多哺乳动物;在许多宿主中已形成独特的亚型,包括:A–F, M56和WC,每种亚型都具有严格的宿主特异性:A亚型宿主为鹦鹉科鸟类,B亚型宿主为鸽,C亚型宿主为鸭和鹅,D亚型宿主为火鸡,E亚型宿主为鸽、鸭及其他鸟类,F亚型宿主为鹦鹉,WC亚型宿主为牛,M56亚型宿主则为啮齿类动物。另外还有一部分亚型,根据16S和23S rRNA序列的差异,被划分为独立物种,如:流产衣原体(Chlamydia abortus)、猫衣原体(Chlamydia felis)、豚鼠衣原体(Chlamydia caviae)和兽类衣原体(Chlamydia pecorum)等。这些衣原体有些可以感染人类:鹦鹉热衣原体感染人类后可引起类似流感的症状,有时会发展为严重肺炎、心内膜炎或脑炎;流产衣原体可引起人类流产和呼吸功能紊乱;猫衣原体可引起人类的结膜炎;豚鼠衣原体可能引起人类肺炎。兽类衣原体尚无感染人类的报道。
鹦鹉热衣原体可使用培养法和血清学方法进行检测。鹦鹉热衣原体在鸡胚卵黄囊及HeLa细胞、猴肾细胞培养中易于生长,但由于耗时费力,且需要实验室安全等级较高,因此培养法很少使用。一些血清学方法,如:补体结合试验、间接血凝试验技术、ELISA、微量免疫荧光法,常用于检测鹦鹉热衣原体,其缺点在于可能产生交叉反应,且灵敏度较低,不适用于早期感染,一般只能用作回顾性诊断。PCR法是一种体外酶促合成特异性DNA 片段的方法,更适合检测鹦鹉热衣原体,其灵敏度高,且特异性强,检测速度快,只需两三个小时即可完成。定量PCR法与普通PCR法相比,操作更为方便,更少受环境污染的影响。
本试剂盒采用探针法定量PCR,针对胞膜外蛋白基因的保守序列设计引物,特异性识别鹦鹉热衣原体、流产衣原体、猫衣原体、豚鼠衣原体、Chlamydia buteonis和Chlamydia ibidis;这几种衣原体均与鹦鹉热衣原体亲缘关系很近或曾归属于鹦鹉热衣原体,而与沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)亲缘关系较远。经BLAST验证,本试剂盒与其他生物基因组没有交叉反应。使用本试剂盒检测了不同的衣原体,以及亲缘关系较近或者较常见的22种细菌,均未发现非特异性信号,沙眼衣原体、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)和兽类衣原体均不能产生特异性信号;对18个临床样本(包括痰、喉拭子和支气管冲洗液)进行检测,获得8个阳性,灵敏度高于ELISA法(6个阳性),与临床诊断结果一致;对源于鸽的9个鼻拭子样本进行检测,获得3个阳性。本试剂盒适用于鹦鹉热衣原体族的检测。
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