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小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽elisa试剂盒

小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽elisa试剂盒

  • 价 格: 2600元
  • 型号:
  • 生 产 地:中国大陆
  • 访问:0次
  • 发布日期:2021/12/23(更新日期:2021/12/23)

上海劲马实验设备有限公司

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以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
  • 详细内容
  • 公司简介
了解更多:http://www.elisa168.com/Products/T5.html(上海劲马生物科技有限公司)
BIM网:
http://www.servicebim.com
联系电话:18221290082
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操作步骤:
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
注意事项:
1.   试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.   浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.   各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.   请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第孔的OD值),请先用样品稀释液稀释定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.   封板膜只限次性使用,以避免交叉污染。
6.   底物请避光保存。
7.   严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8.   所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.   本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。          
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
ELISA 试验时,注意事项如下:
     1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
    2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
    (1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用均可进行筛选:用等量抗原包被,在同实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均性,据此判明其吸附性能是否良好。
   (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有定影响,般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
    (3) 酶标记抗体工作浓度的选择:先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
    (4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目较为满意的供氢体。底物作用段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用加入

上海劲马实验设备有限公司于2010年成立,注生命科学和生物医学域多年,是集研发、生产、销售于一体的生物科技公司。我司为各大高校,科研单位、医院、制药与诊断试剂生产厂家等客户提供多种生物学检测试剂盒,酶联免疫试验代测、酶联免疫试剂盒、TSZelisa试剂盒、原装elisa试剂盒、elisa试剂盒实验代测、进口常规生化试剂、抗体、化学试剂、药典试剂、标准品、血清等科研产品,覆盖分子生物学、生物化学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、生物制药与诊断试剂研发生产等域。经过多年的高速发展,我们先后取得了BIM、ABCAM、RD、TSZ、SIGMA、GIBCO、SPECTRUM、AMRESCO、HYCLONE、NQBB等众多品牌的中国区的代理。 公司自成立以来,就非常注重企业信息化的建设,我们采用了先进的内部供应链信息处理平台,保证客户订单的准确、高效处理。我们的客户关系管理系统和客户关系管理团队,能第一时间响应客户的售、售后需求,关注客户体验及满意度。我们拥有上百名业的客户服务工程师,为您提供业、耐心的服务。我们业,所以值得信赖;我们注,所以我们高速发展;我们信奉“客户至上”,我们坚持“诚信创新,合作共赢”;我们将竭尽所能,为您提供便捷、业的采购服务,节省您的时间和成本。 我们坚信,经过我们的不懈努力,上海劲马实验设备有限公司将成为“生命科学及化学域业、规模大、品种全及配套服务完善的业供应商”,为用户在生化科学域提供“一站式”服务,成为这个行业的dao者。
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