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西尼罗病毒是种基因组约为11kb的单股正链RNA病毒。该病毒基因组5’端为结构蛋白区,3’端为非编码区。这种RNA可直接作为mRNA而翻译成多肽,并在病毒和细胞内蛋白酶的共同作用下被切割成3种结构蛋白(衣壳蛋白C、胞膜蛋白E和膜蛋白prM/M)和7种非结构蛋白(NS1、NS2a、NS2b、NS3、NS4a、NS4b和NS5)。其中E蛋白在西尼罗病毒的生命周期中起着重要作用,也是产生中和抗体的主要病毒蛋白。由于E蛋白可以介导病毒附着以及病毒和宿主的融合,并且大多数中和抗体是针对E蛋白上的抗原表位产生的,因此E蛋白是目西尼罗病毒疫苗开发的佳研究靶点。
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西尼罗病毒胞膜蛋白ELISA检测试剂盒原理:
抗WNV E蛋白的抗体被吸附到微量滴定板上。样品或标准品中存在的WNV E蛋白与吸附在平板上的抗体特异性结合;添加生物素标记的抗WNV E蛋白抗体,与捕获的抗原WNV E蛋白结合。
在孵育和洗涤步骤之后,加入HRP偶联的链霉亲和素,与生物素标记的抗WNV E蛋白抗体结合。在洗涤步骤中去除未结合的链霉亲和素,将与HRP反应的底物溶液添加到孔中。
有色产物的形成与样品中存在的WNV E蛋白的量成比例。加入酸终止反应,并在450nm处测量吸光度。用标准品WNV E蛋白制备标准曲线,然后确定样品WNV E蛋白浓度。
西尼罗病毒胞膜蛋白ELISA检测试剂盒标曲:
发表文章:
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