Lumiprobe/艾美捷-抗体标记试剂盒

Lumiprobe

Lumiprobe 业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。覆盖域有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreen I染料，定制合成荧光双标记引物。主要应用：点击化学（CLickChemistry）、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳（2DDIGE）和实时荧光定量PCR（ReaLtimePCR）。

接下来给大家介绍下Lumiprobe /艾美捷 抗体标记试剂盒的相关内容：

1.抗体制备

标记反应的佳条件如下：浓度为1 mg/mL的抗体溶解在0.1 M碳酸氢钠溶液中。叠氮化钠与标签相容。如果抗体浓度低于1 mg/mL，则应进行浓缩。抗体制备应不含氨基酸、蛋白质（如BSA）和缓冲成分，这些成分会使pH值处于不利（2-7.5或9-12）范围。

2.建立反应

2.1. 向荧光团、旋涡中添加碳酸氢钠抗体溶液（100微克/100微升*），并在室温下培养30分钟。

*如果要标记少量抗体，将冻干染料溶解在10微升无水二甲基亚砜中，每10微克抗体取1微升溶液。应立即消耗DMSO中的染料溶液。

3.标记抗体的纯化

3.1. 准备栏。使用，色谱柱应在室温下。应使用漩涡重新悬浮凝胶。将色谱柱放入废物容器（无盖），并在1000 g下离心2分钟（必须小心控制速度-对于标准6 cm转子，1000 g=3800 rpm）。立柱的小凸起应朝外。

3.2. 应用400微升1x PBS缓冲液，以1000 g离心2分钟。

3.3. 从废物容器上拆下柱。将其放入收集管（带盖）。将100微升反应混合物施加到柱上，培养1分钟，并通过离心以1000 g的速度洗脱抗体2分钟。添加1/100体积的100倍叠氮化钠。抗体可以等分以提高其保存期。当等分试样可储存在+4°С的温度下，其余等分试样可储存在+4°С的温度下−20 °С.

4.染料与抗体比率的测量

为了计算染料与抗体的比率，测量共轭物的吸收光谱，或在280 nm（AAB）和染料吸收大值（ADye）处的吸收。染料标记抗体的典型吸收光谱如下所示。根据染料的不同，大波长可能会有所不同。

Lumiprobe 部分研究工具：

cat# 名称 规格

11030 Cy3 azide 100ul

12030 Cy3.5 azide 100ul

13030 Cy5 azide 100ul

14030 Cy5.5 azide 100ul

14130 FAM azide,5-isomer, 100ul

11130 JOE azide,5-isomer 100ul

14230 R110 azide,5-isomer 100ul

12230 ROX azide,6-isomer 100ul

17130 TAMRA azide, 5-isomer 100ul

33720 Azidobutyric acid NHS ester 100ul

艾美捷科技是Lumiprobe 的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。