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Mabtech 艾美捷 预涂板和步检测能够以zui小的变异性实现更快速的分析。
Mabtech艾美捷该试剂盒组分:
预涂板,mAb 1-D1K(10块透明板)
7-B6-1-ALP结合物(2 x 350μl)
BCIP/NBT plus基质(120毫升)
阳性对照抗CD3单克隆抗体CD3-2(100μl)
Mabtech艾美捷人类干扰素-γELISpotPRO实用指南:
A.平板的制备与封孔
1.从密封包装中取出平板,用无菌PBS(200μl/孔)清洗4次。
2.用含有10%与细胞培养基(200μl/孔)相同血清的培养基处理平板。在室温下培养至少30分钟。
B.细胞在平板中的培养
1.取出培养基,加入刺激物,然后加入细胞悬液。或者,细胞和刺激物可以在加入培养皿之混合。试剂盒中包含的单克隆抗体CD3-2建议作为1:1000稀释度的细胞因子产生的阳性对照。
2.将培养皿置于37°C、含5%CO2的加湿培养箱中,培养12-48小时。在此期间,不要移动盘子,并采取措施避免蒸发(例如用铝箔包裹盘子)。
C斑点检测
1.清空培养皿,取出细胞,用PBS(200μl/孔)清洗5次。
2.在含有0.5%胎牛血清的过滤PBS中稀释7-B6-ALP 1:200。向每个孔中加入100μl,并在室温下培养2小时。
3.用PBS(200μl/孔)清洗平板5次。
4.通过0.45μm过滤器过滤即用基质溶液(BCIP/NBT plus),并在每个孔中添加100μl基质。直到出现明显的斑点。通过在自来水中大量洗涤来阻止颜色的发展。如果需要,移除地下排水管(板下的软塑料)并冲洗膜底面。
5.让盘子晾干。在ELISpot阅读器或解剖显微镜中检查并计数斑点。
6.在室温下将盘子存放在黑暗中。
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艾美捷科技是Mabtech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Mabtech-china-distributor.shtml
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