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MyBioSource 艾美捷该试剂盒组成:
肠肽酶分析缓冲液20毫升
肠肽酶底物0.2ml
人肠肽酶0.17毫升
肠肽酶特异性抑制剂[抑肽酶](0.6 mM)0.1 ml
MyBioSource 艾美捷试剂准备:
1.人肠肽酶:用910µl肠肽酶分析缓冲液重组,获得1mU/µl的溶液。等分保存在-80°C。避免重复冷冻/解冻。在-80°C下稳定2个月。
40 μl Enteropeptidase Assay Buffer
10 μl Enteropeptidase enzyme (1mU/µl)
2.筛选化合物、抑制剂对照品和空白对照品:将候选抑制剂溶解到适当的溶剂中。用肠肽酶分析缓冲液稀释至所需试验浓度的4倍。将25μl稀释试验抑制剂或分析缓冲液添加到肠肽酶孔中,作为样品筛选[S]或酶对照[EC](无抑制剂)。对于抑制剂控制,将10μl肠肽酶特异性抑制剂和15μl肠肽酶分析缓冲液添加到肠肽酶孔中。在室温下培养10-15分钟。
3.肠肽酶底物制备:每个孔制备25μl底物溶液。
23 µl of Enteropeptidase Assay Buffer
2 μl of Enteropeptidase Substrate
混合并向每个孔中添加25µl肠肽酶底物溶液。搅拌均匀。
4.测量:以动力学模式测量荧光30-60分钟(Ex/Em=380/500 nm)。在绘图的线性范围内选择两个时间点(T1和T2),并获得相应的荧光值(RFU1和RFU2)。
MyBioSource 艾美捷该试剂盒存储:
在-20°C温度下存放工具包,避免光线照射。使用将分析缓冲液加热至室温。在打开之,以低速(高速不适合酶)短暂离心小瓶子。
艾美捷科技是MyBioSource的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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