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本方案旨在用于免疫沉淀样本的免疫印迹(IP Western blot),其中相同的抗体(或物种)用于IP和Western Blot(WB)步骤。
Rockland 艾美捷 小鼠IgG TrueBlot®ULTRA作为1000倍溶液提供。为了保存试剂,建议以zui小体积(2-3毫升)在密封袋中培养微凝胶中的斑点(尽可能去除空气)。如果以2.5mls/blot的保守浓度使用,将产生足够20次blot的试剂。
*注意,有三个关键的程序考虑因素:
1.蛋白质A或G珠可用于小鼠、山羊和绵羊TrueBlot二,但不能用于兔子TrueBlot二。将蛋白A或G珠与兔子TrueBlot起使用将导致污染条带。
2.应完全减少免疫沉淀。
3.免疫印迹的阻断蛋白应为BLOTTO/牛奶。
TrueBlot集组件:
1.小鼠IgG TrueBlot®HRP结合单克隆二抗体与小鼠IgG反应,在免疫沉淀/免疫印迹实验中实现佳信号检测。
2.抗小鼠Ig IP珠:2.5 mL.结合0.4 mg Ig/mL珠。
3.Western blot培养皿。
特别注意事项:初次使用IP珠时,建议将小瓶倒置几次,以使珠悬浮。建议使用大口径移液管吸出液体以供使用。对于已打开的小瓶珠子的储存,建议使用副膜密封瓶盖,以帮助防止缓冲液蒸发。为了在检测小鼠IgG1亚型时获得佳结果,建议进行斑点杂交或滴定,以确定所需应用的zui佳稀释系数。
Rockland 艾美捷小鼠TrueBlot套装基本参数:
描述:小鼠TrueBlot®套装(带有IP琼脂糖珠)-88-7788-31
目标物种:老鼠
已知交叉反应性:老鼠
结合:过氧化物酶(辣根)超氧化物歧化酶
克隆性:单克隆抗体
克隆ID:eB144
格式:IgG
检测试剂盒类型:免疫沉淀试剂盒
物理状态:液体(无菌过滤)
装运条件:湿冰
缓冲区:0.01 M磷酸钠,0.15 M氯化钠,pH值7.2
稳定器:0.1 mg/ml牛血清白蛋白(BSA)-IgG和无蛋白酶,50%(v/v)甘油
艾美捷科技是Rockland的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Rockland.shtml
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