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痛点:
其中些纯化方法不是特异性的,因为它们共同纯化外泌体和其他细胞外囊泡。 这意味着当涉及到外泌体内容物的纯化时,细胞外囊泡的内容物也将被纯化。
例如,如果外泌体沉淀中含有凋亡小体,则凋亡小体中所含的DNA也会随着外泌体的RNA、microRNA和蛋白质内容物起被纯化。这可能会误导潜在的分析。
这些方法中的大多数都需要花费大量的时间。
例如,基于polymer的方法需要过夜孵育期。
其中的些方法的低通量限制了样本量,并终限制了外泌体的多样性或产量。
其中的些方法需要在外泌体纯化之进行预处理,以及特殊的仪器。
Norgen用于外泌体纯化的SiC技术:该纯化技术通过调节样品的pH值来改变外泌体表面蛋白的电荷,使其与碳化硅技术结合。Norgen外泌体纯化试剂盒 操作快速、灵敏、特异,允许高通量,不需要特殊的仪器或预处理。
名称及描述 货号 上样量范围
Plasma/Serum Exosome Purification and RNA Isolation Mini Kit 58300 50 ?L - 1 mL
Plasma/Serum Exosome Purification and RNA Isolation Midi Kit 58500 1 mL - 4 mL
Plasma/Serum Exosome Purification and RNA Isolation Maxi Kit 58600 4 mL - 10 mL
Urine Exosome Purification and RNA Isolation Mini Kit 58400 250 ?L - 1 mL
Urine Exosome Purification and RNA Isolation Midi Kit 58700 2 mL - 10 mL
Urine Exosome Purification and RNA Isolation Maxi Kit 58800 11 mL - 30 mL
Cell Culture Media Exosome Purification and RNA Isolation Mini Kit 60700 5 mL - 10 mL
Cell Culture Media Exosome Purification and RNA Isolation Midi Kit 60800 10 mL - 20 mL
Cell Culture Media Exosome Purification and RNA Isolation Maxi Kit 60900 20 mL - 35 mL
Saliva Exosome Purification Kit 65300 Up to 2 mL
Norgen外泌体纯化试剂盒的方法原理:
1.将引入 ExoC buffer 来调整样品的pH值,从而改变外泌体表面蛋白质的电荷。
2.旦 SiC slurry E 被加入到样品中,改性的表面蛋白将结合到 SiC 上并形成沉淀颗粒。
3.由于蛋白质结合的 RNA 也会与 SiC 结合,下步将从SiC和蛋白质结合的RNA中分离外泌体。 ExoR buffer将被引入沉淀颗粒中,并再次修饰外泌体表面蛋白。
4.外泌体将从 SiC 中释放出来,上清液中将包含纯化的外泌体。
关于Norgen外泌体纯化试剂盒的补充要点:
1.在纯化外泌体和RNA方面没有达到预期的产量。产量差异是很大;它取决于细胞的活性、健康状况、年龄等。RNA产量般在1-100 pg/μL范围内。
2.Norgen试剂盒可以从新鲜或冷冻样品中纯化外泌体。但是,如果要使用冷冻样品,不要去除样品中形成的蛋白质沉淀物这点很重要,因为它会含有外泌体。
3.业文章鉴赏:Human myeloma cell- and plasma-derived extracellular vesicles contribute to functional regulation of stromal cells. Proteomics. 2021 (这篇文章展示了正确的分析方法,并证明从Norgen试剂盒中纯化的外泌体可用于蛋白质印迹、质谱、纳米颗粒和电子显微镜检查。)
Rockland研究域包含高质量的抗体-载脂蛋白、细胞周期/凋亡、细胞因子、细胞信号蛋白、酶类、细胞外基质、转录因子(NFkB)和泛素(Ubiquitin)等识别抗体,应用范围包括Western bl
SouthernBiotech艾美捷小鼠抗Bcl-xL-FITC
SouthernBiotech致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)
SouthernBiotech艾美捷山羊抗兔IgG(H+L)
SouthernBiotech致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)
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