艾美捷sGAG检测试剂盒，Blyscan染料来助攻！

接下来小编给大家说的这个艾美捷sGAG检测试剂盒——门用于检测样本中的硫酸氨基聚糖，它采用常规生化方法，通过标准曲线和比色，可定量分析总硫酸化多糖（氨基聚糖和蛋白聚糖）的含量，亦可测定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料，它可以特异性的与氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖组分结合，该方法不适于检测已经降解的硫酸化双糖片段。

艾美捷sGAG检测试剂盒的特点：

可检测广泛的蛋白多糖，可检测的氨基多糖包括硫酸软骨素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、硫酸肝素，不适合检测包含海藻酸的样品，因为它们含有糖醛酸。该试剂盒也不能对透明质酸定量，但透明质酸并不会对硫酸化氨基多糖的检测产生干扰。细胞培养基中20%的胎牛血清也不会干扰实验。该方法检测灵敏度为5ug，所需时间为1小时。

艾美捷sGAG检测试剂盒检测样本：

可来自软骨组织、动脉组织、肺组织、皮肤组织、肿瘤组织、细胞核组织提取物、细胞培养液、羊水和尿液

Blyscan检测流程图：

艾美捷sGAG检测试剂盒实验步骤 ：

1. 绘制标准曲线

2. 待测样品的处理：

取50ul待测样品进行实验。如果反应物在656nm初的吸收峰大于1.5，则对样品进行稀释，待测样样品浓度落入标准曲线中段时，准确度较高。

3. 硫酸氨基聚糖—染料复合物的获得

加1.0ml的Blyscan染料溶液到待测样本中，充分混匀，待不溶物出现，离心，弃上清，则获得紫色的硫酸氨基聚糖—染料复合物

4. 硫酸氨基聚糖—染料复合物中染料的释放

加入1.0ml的染料释放剂，充分混匀。溶解5min以上，使染料充分释放

5. 测定

用分光光度计于波长656nm处测定，或使用colorimeter红色滤光片测定

sGAG检测试剂盒已发表文章，超500篇，仅摘录展示部分：

1、Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.com.

2、Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia ａnd lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.

3、Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. ａnd Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794

4、Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. ａnd Ott,H.C. (2013) Regeneration ａnd experimental orthoic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.