您的位置:首页 > 产品展厅 > 化工原料 > 化学助剂 > 其他化学助剂 > 艾美捷Abbexa 无细胞 DNA 试剂盒说明书
艾美捷Abbexa 套件组件:
结合缓冲液:120 毫升
清洁缓冲液:30 毫升
洗涤缓冲液:24 毫升
洗脱缓冲液:4 ml
蛋白酶 K (20 mg/ml):3 × 1 ml
20% SDS:6 毫升
磁性无细胞珠:2 毫升
艾美捷Abbexa 无细胞 DNA试剂盒基本参数:
目标 游离 DNA
贮存 将磁珠在 2-8°C 下储存长达年,不要冷冻。在室温下储存所有其他试剂。
使用说明 试剂制备:
工作结合缓冲液:在 120 毫升结合缓冲液中加入 40 毫升异丙醇,制备工作结合缓冲溶液。
清洁工作缓冲液:在 30 毫升清洁缓冲液中加入 30 毫升异丙醇,制备清洁工作缓冲溶液。
工作洗涤缓冲液:将 96 毫升异丙醇添加到 24 毫升洗涤缓冲液中以制备工作洗涤缓冲溶液。
注:
使用涡旋磁珠。
使用无菌、无核酸和无核酸酶的离心管和移液器吸头。
游离 DNA 的成分含量J低,建议使用低核酸吸附离心管进行血浆储存、DNA 提取和 DNA 储存。
避免试剂、样品和分离的 DNA 反复冻融循环。
根据下表在 15 ml 或 50 ml 离心管中制备反应系统。
零件 血浆体积
0.5 毫升 1 毫升 2 毫升 4毫升 10 毫升
20% 安全数据表 25微升 50微升 100 微升 200 微升 500 微升
蛋白酶K 15微升 30微升 60微升 120 微升 300 微升
工作绑定缓冲区 0.75 毫升 1.5 毫升 3 毫升 6毫升 15 毫升
磁性无细胞珠 10微升 20微升 40微升 80微升 200 微升
检测程序:
1、根据上表建立反应体系。
2、涡旋管子 15 ,然后在室温下放置 20 分钟。在这段时间内将试管倒置 3-5 次。
3、磁分离:将离心管放在磁力架上,然后用手轻轻地左右旋转离心管。当磁珠开始向管壁聚集时,反转自旋方向,重复 2-3 次。确保盖子上的任何珠子聚集到管壁上。静置 2 分钟并确保所有珠子都聚集在管壁上。
4、从磁珠的另侧丢弃上清液,注意不要去除磁珠本身。从磁力架上取下试管并加入 1 ml 工作清洁缓冲液(含异丙醇)。涡旋 15 ,然后转移到新的 1.5 ml 离心管中。如果磁珠留在原管中,将上清液转移回原管,洗涤,然后转移到 1.5 ml 离心管中。重复步骤 3 进行另次磁选。
5、弃去上清液。将试管从磁力架上取下,加入 1 ml 工作洗涤缓冲液(含异丙醇)。涡旋 15 ,然后重复步骤 3 进行另次磁分离。
6、重复步骤 5。
7、丢弃上清液,包括盖子上的任何液体。建议使用较小尺寸的移液器吸头彻底去除上清液。
8、静置并风干 5-10 分钟。
9、根据下表添加洗脱缓冲液
零件 原始等离子体积
0.5 毫升 1 毫升 2 毫升 4毫升 10 毫升
洗脱缓冲液 20微升 30微升 50微升 75微升 200 微升
涡旋管 5 分钟。
10、将离心管放在磁性支架上。将液体转移到个新的 1.5 ml 低核酸吸附离心管中,注意不要去除磁珠本身。
11、将分离的 DNA 储存在-20°C。
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