艾美捷Worthington弹性蛋白酶背景和特异性介绍

历史：

Eijkman 被认为是个将弹性蛋白酶作为细菌产物进行研究的人（Eijkman 1904）。然而，直到 1949 年 Baló 和 Banga 发表之，它并没有显示出与胰腺的其他蛋白水解成分（例如胰蛋白酶和糜蛋白酶）不同。

1968年，Shotton和Hartley率先获得结晶猪弹性蛋白酶。在 1960 年代后期和 1970 年代初期，研究了弹性蛋白酶在肺气肿、动脉粥样硬化和急性出血性胰腺炎中的作用（Janoff 和 Sherer 1968、Janoff 和 Basch 1971、 Talamo等人1971、Kaplan等人1973 和 Bieth等人. 1974)。1974 年，Ardelt 发现了第二种弹性蛋白酶，将其命名为胰腺“弹性蛋白酶 II”和初的“弹性蛋白酶 I”。

在 1980 年代，研究了弹性蛋白酶的催化特性 (Ascenzi et al . 1983)，并鉴定了抑制剂 (Largman et al . 1980, Lestienne et al . 1981, Kettner ａnd Shenvi 1984, Poncz et al . 1984, ａnd Imperiali and阿贝尔斯 1986 年）。弹性蛋白酶 I 和 II 的遗传信息被研究到 1990 年代（Ornitz等人1985、Stevenson等人1986、Swift等人1984、Tani等人1987 和 Gestin等人1997）。

弹性蛋白酶近被用于研究细胞外基质分解中的机械力和酶活性（Jesudason et al . 2010）。还研究了它在人工器官发育中的用途（Tedder等人2010），并将其用作研究丝氨酸蛋白酶催化活性的模型（Tamada等人2009）。

艾美捷Worthington弹性蛋白酶特异性：

猪弹性蛋白酶 I 对 Ala-Ala 和 Ala-Gly 键具有特异性，而弹性蛋白酶 II 对 P1 位具有中等至大疏水性氨基酸的底物具有广泛的特异性（Gertler等人1977、Del Mar等人1980 和Gestin等人，1997）。猪弹性蛋白酶是有效的弹性蛋白酶，其速率是人类白细胞弹性蛋白酶的 20 倍（Bieth 1978、Bieth 1986 和 Largman 1983）。  

水解发生在几个步骤中。弹性蛋白酶与其底物之间形成吸附复合物，然后进行亲核攻击（S214）以形成酰基酶中间体，并释放个产物（底物的C末端）。中间体在脱酰基步骤中水解，再生活性酶并释放第二个产物 (Bieth 1986)。

艾美捷Worthington弹性蛋白酶分子特征：

猪胰弹性蛋白酶由 240 个氨基酸的单肽链组成，并含有 4 个二硫键 (Sawyer et al . 1973)。它与来自其他物种的胰腺弹性蛋白酶具有高度的序列同性，例如与其共享 86% 同性的大鼠（MacDonald等人，1982）。弹性蛋白酶 I 和 II 基因具有序列相似性，尤其是在 5＇ 近端侧翼区域，包括 TATA 盒和推定的组织特异性增强子序列（Ornitz等人1985、Stevenson等人1986、Swift等人1984， Tani等人1987 和 Gestin等人1997）。

艾美捷Worthington弹性蛋白酶的应用：

组织解离：因为弹性蛋白在结缔组织的弹性纤维中的浓度高，所以经常使用弹性蛋白酶解离含有广泛细胞间纤维网络的组织。为此，它通常与其他酶起使用，例如胶原酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。