艾美捷人IgG2检测试剂盒操作&检验步骤说明

艾美捷人IgG2检测试剂盒试剂准备：

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

艾美捷人IgG2检测试剂盒操作步骤：

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

艾美捷人IgG2检测试剂盒实验结果计算：

以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

艾美捷人IgG2检测试剂盒性能：

1. 检测范围：250 μg/mL – 8000 μg/mL。

2. 灵敏度：低检测浓度小于10 μg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

艾美捷人IgG2检测试剂盒检测步骤：

实验30 min拿出试剂盒，恢复至室温，加入标准品/样本，请洗板3次并甩干

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加入100ul标准品及检测样本到反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育90min↓

加入100ul生物素化抗体工作液至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育60min↓

加入100ul酶结合物工作液至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育30min↓

加入100ul显色底物至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育15min↓

加入50ul终止液，即刻用酶标仪450nm波长下测量OD值（5分钟内）