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多克隆检测试剂通过放大信号,即使是来自表达不佳的目标,仍然提供J佳灵敏度。Jackson 艾美捷多克隆抗体提供了异质性抗体群体,每种抗体都有不同的副镜检测不同部分的一抗体。下图表明,通过结合整个一抗体,而不是一个有限的特定位点/区域/序列,多克隆纳米二抗体可以大量修饰一抗体、实现更高的标记效率和更亮的信号。
图:滋养层染色,用JIR纳米增强亚细胞成像。细胞角蛋白8(蓝色)(DyLight™ 405 VHH片段抗兔子(611-474-215)、vinculin(绿色)(Alexa Fluor®488 VHH片段防老鼠(615-544-214))和F-actin(红色)。细胞角蛋白是一种中间丝,而管状蛋白是一类局灶性粘连。用10%羊驼血清(028-000-001)阻断两幅图像。图片来源:Derek Sung,医学博士/博士生·宾夕法尼亚大学医学院
据报道,VHH片段的独特CDR(互补性确定区域)能够获得传统抗体无法获得的抗原表位(Bannas等人,2017年)。例如,VHH片段CDR3的长环结构可能有助于与蛋白质表面囊袋结合。
纳米二抗体出色的渗透性和间隙
由于纳米体尺寸较小(Chakravarty et al 2014,Debie et al 2020,Hernández et al 2019),因此纳米体表现出良好的组织渗透性,由于其扩散系数低于常规抗体,纳米体可以在组织中自由移动(Jovćevska and Muyldermans,2019)。不存在片段结晶(Fc)进一步提高了分子与组织的清除率,使其成为诊断成像技术(如Immuno-PET)的业工具(Krasniqi等人,2018年)。
Jackson艾美捷纳米二抗体利用这些独特的特性,在无需长时间孵育或潜在破坏性清洁剂的情况下,可实现出色的组织渗透和清除。
染色细胞,死的还是活的
具有Fc片段的常规免疫球蛋白通常仅适用于固定样本的标记,因为活细胞的渗透性可通过Fc片段结合影响生物功能。缺乏Fc片段的纳米体可用于活细胞的免疫染色(Lelek等人,2021)
交叉吸附以获得更好的特异性和更低的背景
JIR纳米二VHH抗体与常用物种交叉吸附,以降低背景并增强特异性。Jackson艾美捷Nano Secondarys套件可以结合使用,生成非常具体的多标签图像。
获得全系列染料
使用共轭纳米的间接标记给研究人员提供了更多的实验范围,允许他们使用荧光团来利用在GFP等融合标签中克隆时可能无法获得的波长。除了在蛋白质上添加融合标签的潜在困难外,为了避免克隆,可以避免蛋白质修饰产生的伪影,以提供更具代表性的功能数据(Lelek等人2021)。Jackson艾美捷JIR纳米二价体可与紫外到远红色的荧光结合,使研究人员在建立实验时具有大的灵活性,特别是那些识别多个目标蛋白的实验。
相关文献:
Bannas, P., Hambach, J. and Koch-Nolte, F., 2017. Nanobodies and Nanobody-Based Human Heavy Chain Antibodies As Antitumor Therapeutics. Frontiers in Immunology, 8.
Barakat, S., Berksoz, M., Zahedimaram, P., Piepoli, S. and Erman, B., 2022. Nanobodies as molecular imaging probes. Free Radical Biology and Medicine,.
Beltrán Hernández, I., Rompen, R., Rossin, R., Xenaki, K., Katrukha, E., Nicolay, K., van Bergen en Henegouwen, P., Grüll, H. and Oliveira, S., 2019. Imaging of Tumor Spheroids, Dual-Isoe SPECT, and Autoradiographic Analysis to Assess the Tumor Uptake and Distribution of Different Nanobodies. Molecular Imaging and Biology, 21(6), pp.1079-1088.
Jackson ImmunoResearch注于亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白研究,服务于大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。艾美捷科技是Jackson的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml
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