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荧光探针或荧光团(荧光染料或蛋白质)与二抗体或链霉亲和素偶联,以使分析物可视化。每个荧光团都有自己的光谱特性,分子特有的激发光谱和发射光谱。Jackson艾美捷荧光有助于多种技术同时检测多种分析物,包括流式细胞术、荧光显微镜(表观荧光、共焦、多光子和超分辨技术)、Western blotting和ELISA。
荧光探针的选择取决于许多实验变量,如下所述。还有一个Spectra Viewer Tool可帮助进行实验设计。
Jackson艾美捷荧光粉选择技巧:
荧光团的选择取决于预期应用。样品的具体情况会影响选择,因为它们可能适应特定荧光团的使用,而制备可能会改变荧光团的行为方式。下表列出了一些与为特定技术选择荧光团相关的注意事项。
仪器性能
考虑激发能力(灯、激光器或LED决定激发波长)以及可用通道和滤波器的数量。还应考虑检测系统、数据收集持续时间和分析后分析。
需要灵敏度
任何荧光抗体结合物的检测水平取决于染料的亮度和光稳定性;抗体活性、特异性和交叉反应性;佳染料抗体比(每摩尔抗体的染料摩尔数)。已对每种JIR染料结合物的这些参数进行了研究,以优化抗体检测水平并小化背景。较大的藻胆蛋白具有较高的量子产率(非常明亮),但仅限于表面应用。通过选择较亮的荧光团,可以增强对表达差的分析物的检测。例如,Alexa Fluor®488比FITC更亮。
实验样品
考虑样本的自体荧光和重组荧光标记蛋白的可能表达。选择光谱不与内源性荧光重叠的荧光团。
要求分色程度
对于多种标记协议,染料面板的选择将受到上述仪器和样品细节的限制。要实现良好的分色,请选择光谱重叠小的荧光团。
Jackson艾美捷光谱查看器
荧光探针或荧光团(荧光染料或蛋白质)与二抗体或链霉亲和素偶联,以使分析物可视化。每个荧光团都有自己的光谱特性,分子特有的激发光谱和发射光谱。使用光谱查看器构建染料面板,并比较染料的适用性。通常建议用于多重标记的四种染料是预先装载的,可以根据需要进行更改。
Jackson ImmunoResearch注于亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白研究,服务于大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。艾美捷科技是Jackson的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml
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