Jackson丨选择合适的亲和纯化二抗体之合适的类型

亲和力纯化的二抗体有三种不同的形式，好的选择取决于预期的应用。从整体IgG、F（ab＇）2片段或Fab片段抗体中选择。整个IgG形式的抗体适用于大多数免疫检测程序。

Jackson艾美捷F（ab’）2和Fab抗体可用于具有特定检测要求的实验。抗血清尚未进行亲和纯化。

图：IgG的消化（大约MW=160 kDa）产生了许多不同的片段。木瓜蛋白酶消化产生两个单价Fab片段和一个Fc片段，每个片段约50 kDa。胃蛋白酶消化降解Fc结构域，留下分子量约为110 kDa的二价F（ab’）2片段。

整个IgG抗体

通过免疫亲和层析从抗血清中分离出整个IgG抗体。它们有一个Fc区和两个由二硫键连接在一起的抗原结合Fab区（上图），因此它们是二价的。据报道，平均分子量约为160kDa。整个IgG形式的抗体适用于大多数免疫检测程序，并且J具成本效益。

F（ab＇）2片段抗体

F（ab’）2片段抗体是通过胃蛋白酶消化整个IgG抗体生成的，以去除大部分Fc区，同时保留部分完整的铰链区。F（ab’）2片段有两个通过二硫键连接在一起的抗原结合Fab区域，因此它们是二价的。平均分子量约为110kDa。它们用于特定的应用，例如避免活细胞的次抗体与Fc受体或蛋白质A或蛋白质G结合。

如果一抗体是完整的IgG抗体，则也可能发生与Fc受体的结合，无论二抗体的形式如何，都会产生背景。为了阻止整个IgG一和二抗体与Fc受体结合，在含有5%标记二抗体宿主正常血清的缓冲液中培养细胞。

为了防止活细胞上Fc受体的覆盖、内吞和再生，在4°C下，在含有5%正常血清的缓冲液中培养，并添加叠氮化钠以抑制代谢。关于避免背景的更多信息。

Jackson艾美捷Fab片段二抗体

Fab片段抗体是通过木瓜蛋白酶消化整个IgG抗体产生的，以去除整个Fc部分，包括铰链区域（上图）。这些抗体是单价的，只含有一个抗原结合位点。Fab片段的分子量约为50kDa。它们可用于阻断细胞、组织或其他表面上的内源性免疫球蛋白，并在使用来自同一物种的初抗体的多重标记实验中阻断暴露的免疫球蛋白。

Jackson艾美捷FabuLight抗体

FabuLight 抗体是特异于IgG或IgM一抗体Fc区的Fab片段二抗体。它们能够在与细胞或组织孵育之标记一抗体，而不会损害一抗体的活性部位。它们也可用于标记细胞表面免疫球蛋白，而无需交联和激活B细胞。

抗血清

抗血清通常用于免疫沉淀分析，如免疫扩散和免疫电泳，但不适用于包衣ELISA板或其他需要亲和纯化抗体的应用。建议使用抗全IgG分子的抗血清（抗IgG（H+L））将PAP桥接至一抗体。

Jackson ImmunoResearch注于亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白研究，服务于大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。艾美捷科技是Jackson的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml