Worthington丨艾美捷Worthington醛缩酶研究方案

醛缩酶存在于所有动植物组织以及大多数微生物中。在动物和高等植物组织中发现的 I 类醛缩酶的特点是不需要二价金属辅因子，并且与底物磷酸二羟丙酮形成酮亚胺席夫碱中间体。仅在原核生物和低等真核生物中发现的 II 类醛缩酶需要二价金属辅因子（Heron 和 Caprioli 1975，London 1974，和 Lebherz等人1973，Gefflaut等人1995）。I 类醛缩酶分为三种类型： A 型（主要形式）存在于肌肉中；肝肾B型；和大脑中的 C 型（加上一些 A）（Horecker等人1972）。

艾美捷Worthington醛缩酶稳定性/储存：酶在低于 4.5 的 pH 值下发生不可逆的变性。硫酸铵溶液中的结晶悬浮液，pH 7.6，在 2-8°C 下可稳定至少六个月。

单位定义：

在 25°C、pH 7.5 条件下，一个单位会导致每分钟增加 1.0 A240，采用肼/3-磷酸甘油醛测定法（Jagannathan等人，Biochem. J., 63 94, 1956）。

艾美捷Worthington醛缩酶应用：

化学酶合成（Bolt et al . 2008 和 Calveras et al. 2009）

结构-功能研究 (St.-Jean et al. 2005)

有机合成（Castillo等人， 2006 年，Concia等人， 2009 年）

D-果糖-1,6-二磷酸的定量

耦合反应中的代谢物测定 (Hiller et al. 2007)

柱和凝胶中的分子量标记

艾美捷Worthington醛缩酶的特征：

分子量：

156.8 kDa（理论值）

x佳 pH：

6.9-8.8

等电点：

8.47（理论）

消光系数：

133,560 cm -1 M -1（理论值）

E 1%,280 = 8.52（理论）

活性位点残留：

赖氨酸 (K229)

谷氨酸 (E187)

加上其他带电残基（由于在活性位点发现的许多带电氨基酸非常接近，功能分配很复杂）（St.-Jean et al . 2005）

艾美捷Worthington醛缩酶测定方法：

基于 Boyer 对肼测定法的改进 (Jagannathan等人1956)，其中 3-磷酸甘油醛与肼反应形成在 240 nm 处吸收的腙。该系统的优点是其简单性和特异性。一个单位被描述为在指定条件下 25°C 和 pH 7.5 时每分钟 1.00 的吸光度变化。Rutter (1961) 已经描述了测定醛缩酶的替代方法。已使用偶联的α-甘油磷酸脱氢酶测定法（Richards et al . 1961）。

艾美捷Worthington醛缩酶部分参考文献：

Allen, B. , Gracy, R. ａnd Harris, B.

Studies on Aldolase from Human Cardiac Tissue , Arch Biochem Biophys 155 , 325 , 1973

Anderson, L. , Heinrikson, R. ａnd Nyes, C.

Chloroplast ａnd Cylasmic Enzymes. Subunit Structure of Pea Leaf Aldolases , Arch Biochem Biophys 169 , 262 , 1975

Anderson, P. ａnd Kaplan, H.

Reactivity of the Active-Centre Lysine Residue of Rabbit Muscle Aldolase , Biochem J 137 , 181 , 1974

Worthington核心酶用于生命科学研究、原代细胞和干细胞分离、生物加工、生物制药、诊断和生物技术应用。艾美捷科技是Worthington的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/merchants/Worthington-n.html