艾美捷Cas9 ELISA检测试剂盒的制备和文献参考

- 1X 洗涤缓冲液。用去离子水将10倍的洗涤缓冲液稀释到1倍。搅拌至均匀。

- 生物素化的抗Cas9抗体和链霉菌素-酶结合物。在使用立即将生物素化的抗Cas9抗体和链霉蛋白-酶结合物用1:1000的稀释液稀释。检测稀释液。不要储存稀释后的溶液。

艾美捷 Cas9 ELISA检测试剂盒标准曲线的制备：

在0到100纳克/毫升的浓度范围内准备Cas9标准品的稀释系列（图1）。

图1：Pyogenes Cas9标准的制备 

图2：检测转染的293细胞中的Cas9。用Cas9的哺乳动物表达载体瞬时转染细胞或模拟转染细胞。哺乳动物表达载体或模拟转染。48小时后，用RIPA缓冲液裂解细胞。并测定蛋白浓度。Cas9 ELISA试剂盒在没有细胞裂解液的情况下进行。

在没有细胞裂解液（阴性）、有50纳克/毫升Cas9核酸酶（阳性）（NEB目录号M0386）、有10微克蛋白裂解液（阳性）的情况下进行Cas9酶联免疫吸附试验。存在10µg模拟转染（Mock）或Cas9转染（Cas9）的蛋白裂解液。

艾美捷 Cas9 ELISA检测试剂盒相关文献：

1. Heler, R; Samai, P; Modell, J. W.; Weiner, C; Goldberg, G. W.; Bikard, D; Marraffini, L. A.

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2. Jinek, M.; Chylinski, K.; Fonfara, I.; Hauer, M.; Doudna, J. A.; Charpentier, E. (2012). Science.

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3. Mali, Prashant; Esvelt, Kevin M; Church, George M (2013). Nature Meth. 10: 957-963.

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Sriram; Yang, Luhan; Church, George M (2013). Nature Biotech. 31: 833-838.

5. Gilbert, Luke A.; Larson, Matthew H.; Morsut, Leonardo; Liu, Zairan; Brar, Gloria A.; Torres,

Sandra E.; Stern-Ginossar, Noam; Brandman, Onn; Whitehead, Evan H.; Doudna, Jennifer A.;

Lim, Wendell A.; Weissman, Jonathan S.; Qi, Lei S. (2013). Cell. 154: 442-451.

6. Zheng Q, Cai X, Tan MH, Schaffert S, Arnold CP, Gong X, Chen C-Z, ａnd Huang S. (2014)

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来源：https://www.amyjet.com/products/PRB-5079.shtml