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蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶,对脂肪族、芳香族和其他疏水性氨基酸具有广泛的特异性。PROK的分子量为27000道尔顿,并且依赖于Ca2+。它不被金属离子螯合剂如EDTA、巯基试剂、PCMB、TLCK或TPCK灭活。它在0.5%SDS中也保持活性。它可以被PMSF或DFP抑制。
稳定性/储存:冻干粉末在2-8°C下稳定一年。50mM Tris-HCl,pH 8.0和1mM CaCl2的溶液在2-8°C下稳定数月。储存于2-8°C。
艾美捷Worthington蛋白酶K相关研究:
白蛋白,无核酸酶(BSANF)
脱氧核糖核酸酶I(DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
组蛋白(H,NHL)
溶菌酶(LY/LYSF)
核酸酶,微球菌(NFCP)
核酸酶,S1(SINUC/SINUCL)
核酸、DNA、大肠杆菌、Lambda/片段、RNA
碱性磷酸酶(CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)
磷酸二酯酶I(VPH)
磷酸二酯酶II(SPH)
逆转录酶,重组HIV(RTHIV)
核糖核酸酶A(R/RAF/RASE/RS/RPDF)
无动物源核糖核酸酶T1(RT1S)
单位定义:
在37°C,pH 7.5,使用尿素变性血红蛋白作为底物,One Unit释放1微摩尔Folin阳性氨基酸(以酪氨酸计)。
蛋白酶K(PROK)是一种具有广泛作用的丝氨酸内肽酶,从真菌Tritirachium album liber的滤液中分离出来。
艾美捷Worthington Tritirachium album liber蛋白酶K的特征:
特异性
除了肽键的裂解,它还能够催化肽酰胺水解。蛋白酶K被氟磷酸二异丙酯(DFP)或苯基-甲-烷-磺-酰氟(PMSF)灭活。螯合剂如柠檬酸盐和EDTA对酶活性没有影响。
应用
蛋白酶K在分离高度天然、未受损的DNA或RNA中非常有用,因为大多数微生物或哺乳动物的DNA和RNA都被酶快速灭活,特别是在0.5-1%SDS存在下。
蛋白酶K的特性
分子量
28900道尔顿。
J佳pH值
7.5-12,以变性血红蛋白为底物。
存储
PROK/PROKR:储存温度为2-8°C;PROKS/PROKRS:储存温度-20°C
沃辛顿PROK/PROKR是一种高纯度冻干粉末。代码PROKS/PROKRS是含有50%甘油的20mg/ml溶液。两者均经测试不含DNase和RNase。
稳定性
尽管钙离子不影响酶的活性,但当浓度为1-5μmol时,它们确实有助于酶的稳定性。蛋白酶K的一个有趣的特征是,它在十二烷基硫酸钠(SDS)或尿素存在下保持活性。(0.5-1%SDS和1-4M尿素)。将反应温度从37℃提高到50℃-60℃可以将活性提高几倍。蛋白酶K的一个特殊特征是其消化天然蛋白质的能力,从而使酶如DNase和RNase失活,而无需借助变性过程。
Worthington从各种动植物组织和各种微生物来源(如细菌、真菌和霉菌)中提取酶。根据该酶在材料中的普遍性选择特定酶的起始材料。其核心酶产品包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/merchants/Worthington-n.html
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