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艾美捷双链RNA定量试剂盒试验方案

艾美捷双链RNA定量试剂盒试验方案

  • 价 格: 电议
  • 型号:
  • 生 产 地:中国大陆
  • 访问:0次
  • 发布日期:2022/11/7(更新日期:2022/11/7)

武汉艾美捷科技有限公司

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产品展示

基于使用两种双链 RNA (dsRNA) 特异性单克隆抗体,dsRNA 检测试剂盒可以灵敏和选择性地检测 dsRNA 分子(大于 30-40 bp),而不受其核苷酸组成和序列的影响。
  • 详细内容
  • 公司简介
 艾美捷双链RNA定量试剂盒基本参数:

品名:双链RNAdsRNA),ELISA试剂盒

同义词名称dsRNA ELISA试剂盒

仅供研究使用。不适用于诊断程序。

克隆性单克隆

同位素小鼠IgG2a-kappa/IgM-kappa

克隆编号J2/K2

物种反应性全体的

 

艾美捷双链RNA定量试剂盒来源

本试剂盒中使用的两种dsRNA抗体如下:雌性DBA/2小鼠腹腔注射50ug L-dsRNA75ug甲基化牛血清白蛋白的混合物,在完全弗氏佐剂中乳化。在几次增强后,将脾细胞与Sp2/0-Agl4骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤克隆J2K2

 

该试剂盒包含以下试剂,用于200次测试(2x96孔):

试剂011小瓶包衣抗体(储存于-20

试剂A1小瓶142 bp dsRNA作为阳性对照(储存于-20℃)

试剂B1小瓶dsRNA特异性检测抗体(在RPMI+5%FBS中,储存在+4℃或好是-20℃)

试剂C1小瓶HRP缀合的Fab’)2山羊抗小鼠二抗体片段(储存于+4℃或-20℃)

试剂D1小瓶TMB底物溶液(储存于+4℃,避光

 

艾美捷双链RNA定量试剂盒试验方案

所需但未提供的材料和设备

2ELISA板(96孔)

具有370 nm450 nm双波长能力的微量板读数分光光度计。

单通道移液管-10ul200ul

多通道移液管-200ul

抗原(标准和样品)稀释剂(STE缓冲液:0.1M NaCl1mM EDTA50mM Tris-HClpH7.0

洗涤缓冲液(PBS+0.5%吐温20PBS:10mM Pi缓冲液,pH7.20.15M NaCl

二抗体稀释缓冲液(PBS+1%BSA

培养箱,允许在37℃下培养。

2米硫酸氢

试剂和ELISA板的制备

通过加入4ul不含RNaseMilliQ水,重新配制试剂A。浓度为1ug/ul dsRNA。(储存于-20摄氏度或-80摄氏度)

使用DEPC处理过的MilliQ水制备STE(适用于您自己的样品制备)

通过高压灭菌灭菌PBSSTE

制备PBS+1%BSAELISA洗涤缓冲液

ELISA板涂层

将试剂01管的总含量转移到21 ml PBS中,充分混合并立即在2ELISA板中分配100ul/孔。

盖上盘子,在4摄氏度下孵育过夜。

将井中的内容物丢弃到废物中。向每个孔中加入100ul/1%BSAPBS+0.2%NaN3中的溶液,并在37℃下孵育2小时,以饱和板上任何剩余的自由结合位点。

丢弃溶液并用PBS+0.5%吐温20洗涤板3次。

然后可以直接使用或储存这些板。为了储存,用含0.2%叠氮化钠的200ul/PBS填充孔。将盘子用塑料箔包裹起来,在4摄氏度下冷藏保存。它们可以在一个月内保持活力。使用储存板时,必须用PBS彻底清洗,以去除所有痕量的NaN3

1个板的分析方案:

所有标准品和样品应至少检测两份。

使用干净、无RNase的带盖微型离心管。

不要使用含有NaN3的缓冲液,因为它会干扰终检测步骤。

1.从试剂A制备1:3系列稀释液。dsRNA标准品的稀释系列应在样品的预期dsRNA浓度范围内。我们建议以30ng dsRNA/孔作为高浓度,并稀释至低于0.01ng dsRNA/孔。每次化验应新鲜稀释。

2.STE中制备样品稀释液(必要时)。

3.盖上并旋涡所有稀释的标准品和样品。

4.ELISA板上取下塑料箔,丢弃液体并用PBS+0.5%吐温20洗涤两次。

5.丢弃溶液并将100-100ul抗原转移到板中的重复孔中。

6.盖上盖子并在37℃下孵育60分钟。

7.将井中的内容物丢弃到废物中。用PBS+0.5%吐温20洗涤板4次,每孔加入250ul洗涤液。在加入下一种溶液之,不要让井变干。

8.用移液管将100ul未稀释试剂B移到所有孔中。

9.盖上盖子,在37℃下孵育60分钟。

10.在孵育(步骤9)期间,通过将1.4ul试剂C移液至10ml PBS+1%BSA

 

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艾美捷双链RNA定量试剂盒原理:

基于使用两种双链 RNA (dsRNA) 特异性单克隆抗体,dsRNA 检测试剂盒可以灵敏和选择性地检测 dsRNA 分子(大于 30-40 bp),而不受其核苷酸组成和序列的影响。检测具有高度特异性:在存在 1.000-10.000 倍过量其他核酸的情况下,可以检测核酸提取物中的dsRNA。该测定基于双抗夹心ELISA原理,使用 J2 (IgG2a) 小鼠单克隆抗体作为捕获抗体,单克隆抗体 K2 (IgM) 用作检测抗体。

 

来源:https://www.amyjet.com/brand/double-stranded-dsrna.shtml

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武汉艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc),简称艾美捷科技(AmyJet Scientific)。2010年底成立于九省通衢的湖北省武汉市,历经五年多的发展,已成为国内知名的集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技生物企业。艾美捷科技总部设在武汉市洪山区光谷大道35号光谷总部国际二期时代1号楼13层,业务覆盖全国。
 
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艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:Merck Millipore、Origene、AAT Bioquest、ABGENT、 Cayman Chemical、Abnova 、Biovision、ProSpec、Hycult Biotech 、Equitech-Bio、Trevigen、Alomone Labs、Epigentek、Abbkine、ImmunoReagents 、Jackson、SouthernBiotech、US Biological 、VIVA Bioscience 、Caisson Labs等,可以在第一时间为用户提供最前沿的专业资讯、完备的产品及物流服务。
 
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                                                                           办公区  
随着公司业务的壮大,为了更好的服务客户,公司组建了一支在生物领域经验丰富的研发团队-艾美捷生物技术中心,宣布进入自主研发阶段,以期将更多更优质的产品推荐给国内生物领域的同仁。相信在不久的将来,将陆续有印有艾美捷Logo的产品与大家见面,并逐渐受到大家的认可!
 
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专业的技术力量使我们能够为广大用户提供强大的技术支持,深厚的人脉资源使我们在全国主要城市拥有众多合作伙伴,艾美捷科技非常荣幸能将世界上最先进的生物产品推荐给国内从事生物学领域科研的老师和同仁,配备的优秀销售队伍以及专业的技术支持,随时为客户提供技术咨询和售后服务。
作为专业性的产品供应公司,公司出资储备了大量现货;作为产品研发公司,公司必将不遗余力,努力向专业化、国际化标准迈进,打造科技与服务并存型企业!
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