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喜树碱是一种有效的细胞毒性五环生物碱,以其强大的细胞凋亡诱导特性而闻名。喜树碱及其类似物已被证明能抑制拓扑异构酶I(o I),导致S期细胞凋亡。喜树碱结合并稳定拓扑I-DNA骨架复合物(共价二元复合物)。这种稳定的复合物降低了断裂链中o I的释放速率,从而减缓了再聚合和随后的DNA合成过程。在凋亡检测实验中使用喜树碱创建阳性对照。
ImmunoChemistry艾美捷喜树碱化学性质:
试剂名称喜树碱
靶DNA拓扑异构酶I
样品类型细胞培养
储存-20°C
ImmunoChemistry艾美捷喜树碱协议:
1.将喜树碱粉末溶解在组织培养DMSO中,以获得2mg/mL喜树碱储备浓度。
2.制备50–100µL的DMSO增溶喜树碱等分试样,并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜树碱可在丢弃再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶,以表明这一点,以便它们在丢弃只经过一次解冻。
3.喜树碱浓度范围为2–4µg/mL的刺突细胞培养物,产生6–12µM的细胞培养物喜树碱浓度。该喜树碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL 60细胞悬浮液,其浓度范围通常为1 x 105–1 x 106细胞/mL。在此浓度范围内,培养4小时(37°C)后成功诱导凋亡。
4.对您的特定细胞系进行时间历程研究,以确定佳喜树碱浓度和暴露时间,从而为您的实验实现良好的凋亡诱导水平。
5.继续您的实验性凋亡诱导模型系统。
ImmunoChemistry Technologies简称"ICT",提供各种细胞蛋白酶、细胞凋亡与细胞毒性检测试剂盒等研究工具,同时包含高质量高灵敏度的 ELISA开发试剂。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml
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