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炎症性半胱天冬酶,如caspase-1,在触发裂解性程序性细胞死亡(称为焦下垂)的机制中起着关键作用。
ImmunoChemistry艾美捷黑色素可作为焦下垂实验中的阳性对照。黑曲霉素是一种从吸水链霉菌中提取的有效微生物毒素。它作为钾离子载体,诱导细胞内钾水平的净降低,这对于NLRP3炎症小体的寡聚化和caspase-1的激活至关重要。它需要通过泛-1发出信号,以诱导caspase-1的活化和IL-1ß的加工和释放。已经表明,它在包括Jurkat和THP-I细胞在内的各种细胞系中产生了强大的caspase-1激活反应。。
ImmunoChemistry艾美捷黑色素组分:
用100µL DMSO重新配制每小瓶尼格瑞金,形成5mM储备浓缩液。一旦重组,可等分并储存在≤ -20°C,避光1年,在此期间解冻不超过两次。
在加入样品和对照品之,立即在diH2O中以1:10的比例稀释5mM Nigericin原液,形成500µM工作溶液,用于处理样品。例如,通过向180µL diH2O中添加20µL储备浓缩液来稀释1:10。
使用1-20µM的Nigericin在细胞中诱导NLRP3炎症小体激活。例如,要在10µM下使用,将500µM工作溶液稀释至1:50;e、 g.用6µL 500µM工作溶液加标294µL细胞悬浮液/覆盖培养基。37°C时的典型处理时间为3-24小时。每个研究者应调整尼格瑞林的浓度和治疗期,以适应特定的细胞系和研究条件。
NLRP3炎症小体活化可通过ELISA或Western blot检测分泌的促炎细胞因子IL-1β或IL-18,或通过使用caspase-1活化测定法,如ICT的caspase-1测定试剂盒或Pyroposis/caspase-1检测试剂盒来检测。
ImmunoChemistry Technologies简称"ICT",提供各种细胞蛋白酶、细胞凋亡与细胞毒性检测试剂盒等研究工具,同时包含高质量高灵敏度的 ELISA开发试剂。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml
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