艾美捷天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒解决方案

细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。其中Caspase-1是唯一可剪切IL-1b和IL-18体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1体蛋白产生20kD和10kD片断，这两个片断可以形成异源二聚体，并进一步形成四聚体。此四聚体具有蛋白酶活性。Caspase-1通过剪切Bcl-XL调节细胞凋亡，并通过对细胞因子体的剪切来调控相关细胞因子介导的免疫炎性反应。试剂盒测定原理基于Caspase-1特异水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-YVAD-pNA)，释放出游离的硝基苯胺pNA，后者呈黄色在405 nm具有大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-1的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。

艾美捷天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒适用：测定哺乳动物组织、细胞caspase-1活性。

原理：

艾美捷天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒是无细胞毒性的，细胞膜渗透抑制剂。进入每个细胞，并不可逆地与活化的caspase-1结合。任何未结合的FAM-YVAD-FMK-FLICA试剂扩散出细胞并被冲走。因此留在细胞内的绿色荧光直接体现了活性caspase-1酶活性的。荧光结果可通过荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪进行分析。

组分：

25T：

l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 1 vial, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 15 mL, #635 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual

100T：

l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 4 vials, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 60 mL, #634 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual

保存条件：2-8°C 避光保存。

艾美捷FAM-FLICA 天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒Nature文章鉴赏：

IF=30.9, 《Escherichia coli Rho GTPase-activating toxin CNF1 mediates NLRP3 inflammasome activation via p21-activated kinases-1/2 during bacteraemia in mice》,Nature Microbiology

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml