特定探针之艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒

活性氧 (Reactive Oxygen Species, ROS) 是细胞代谢过程中产生的一系列含氧物质，包括超氧化物、过氧化氢、羟自由基以及具有高氧化活性的活性氧代谢产物，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。其中，细胞内活性氧的升高是细胞凋亡的标志之一。活性氧主要由中性粒细胞、巨噬细胞、单核细胞为代表的免疫细胞受到刺激后产生，其它体细胞在应激条件下线粒体电子传递异常也会产生活性氧。免疫细胞产生的活性氧能够抵御微生物的感染。在病理条件下，过度产生的活性氧也会导致机体损伤和引发各种疾病。活性氧(ROS)参与许多退行性神经系统病症，如阿兹海默症、帕金森症、萎缩性脊髓侧索硬化以及年老或外伤导致的脑功能紊乱等。此外活性氧是植物体内正常代谢的信号小分子，在植物的生长发育和抗逆反应中具有重要作用。

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艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒是一种用于测量总自由基含量的检测试剂盒一个样本。该分析使用有的淬灭荧光探针，二氯二氢荧光素DiOxyQ（DCFH-DiOxyQ），是一种特定的ROS/RNS探针，基于与流行的2＇，7＇-二氯二氢荧光素二乙酸酯。DCFH DiOxyQ探头先用

然后以高反应性DCFH形式稳定反应状态下，ROS和RNS物质可以与DCFH反应，DCFH被迅速氧化成荧光2＇，7＇-二氯二氢荧光素（DCF）。荧光强度成比例与样品内的总ROS/RNS水平相关。DCFH DiOxyQ探针可与氢气反应过氧化物（H2O2）、过氧自由基（ROO）、一氧化氮（NO）和过氧亚硝酸根阴离子（ONO-). 这些自由基分子是ROS和RNS的代表，因此允许测量样本中的总自由基群体。

艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒也可以用于评估抗氧化剂对自由基的影响。该试剂盒的检测灵敏度限为10pMDCF和H2O2分别为40nM。每个试剂盒提供足够的试剂，多可进行96次分析，包括标准曲线和未知样品。

艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒组分：

1.底漆试剂（234701）：一管250µL溶液。

2.稳定溶液（10X）（234702）：一管1.5 mL溶液。

3.催化剂（250X）（234703）：一管20µL溶液。

4.DCF DiOxyQ（234704）：一个50µL琥珀色甲醇溶液管。

5.DCF标准品（234202）：一个100µL琥珀色管，含有1mM DMSO溶液。

6.过氧化氢（234102）：一个100µL琥珀色管，装有8.821M溶液。

检测原理：

该试剂盒是一种用于测量游离ROS/RNS总量的体外测定试剂盒自由基活性。用催化剂将未知的ROS或RNS样品或标准加入到井中这有助于加速氧化反应。短暂孵育后，制备的DCFH探针添加到所有孔中，并允许氧化反应进行。测量样品对过氧化氢或DCF标准进行荧光测定。在96孔中进行测定可以在标准荧光板读取器上读取的荧光板格式。自由基通过与预定的DCF或氢进行比较来确定未知样品中的含量过氧化物标准曲线。

相关研究：

1.STA-330：OxiSelect™ TBARS测定试剂盒（MDA定量）

2.STA-340：OxiSelect™ 超氧化物歧化酶活性测定

3.STA-341：OxiSelect™ 过氧化氢酶活性测定试剂盒

4.STA-342：OxiSelect™ 细胞内ROS测定试剂盒（绿色荧光）

相关文献：

1.Bass DA，Parce JW，Dechatelet LR，Szejda P，Seeds MC，Thomas M.流式细胞术研究

中性粒细胞氧化产物的形成：对膜刺激的分反应。J免疫；

2.Brandt R，Keston AS。二乙酰二氯荧光素的合成；

3.Keston AS，Brandt R.超微量过氧化氢的荧光分析。