注意事项丨艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒

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Annexin V是一种分子量为358kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,广泛分布于真核细胞胞浆内,参与细胞信号转导。Annexin V能与磷酯酰丝氨酸( phosphatidylserine简称PS)高亲和力、特异地结合。在正常细胞要分布在细胞膜内侧,在细胞发生凋亡的早期,细胞膜上的PS会外翻到细胞表面。用带有绿色荧光的 Annexinv-fitc标识出凋亡细胞。

艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒还提供了碘化丙啶（PI），PI可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现紅色荧光,用 Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后,正常的活细胞不被Annexin V-FITC和PI染色;凋亡早期的细胞仅被Annexin V-FITC染色,PI染色呈阴性;坏死細胞和凋亡晚期的细胞可以同时被 Annexin V-FTC和PI双重染色,以区别凋亡早期细胞。

艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒注意事项：

1.该试剂盒只能检测活细胞,而不能用于切片、擦刮、固定或浸润细胞样品的检测。

2.细胞凋亡是一种持续变化的动态过程,选择合适的诱导时间对观察凋亡比较重要。染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加

3.如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。

4.PBS洗涤细胞,洗掉残留的胰酶,否则残留的胰酶会消化并降解 Annexin V-FTC,終导致染色失败。

5.荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存

6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

7检测血液样品时,如果含有血小板,请使用含有EDTA的缓冲剂并200xg离心洗去血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合，从而干扰试验结果。

8.旋帽离心管装的试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落

9. Annexinv-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光

Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒保存条件：

4℃保存, Annexin V-FTC、P|染色液需避光保存,半年有效。若长期保存,可以把P染色液适当分装后-20℃保存, Annexin V-FITC结合液可以直接-20℃保存

来源：艾美捷科技