WBC-LS02112中性蛋白酶分子特征及应用介绍

蛋白质由氨基酸组成,是自然界中发现的复杂的有机化合物之一。由盐酸和蛋白酶分解成易被高等动物的肠道和微生物有机体的细胞膜吸收的氨基酸包括人类在内的每种动物,必须要有足够的蛋自质来维持自身生长,来生成每个细胞所必需的氢基酸,一些特种蛋自质还是某些特殊细胞、腺体分泌物、度和激素的功能性组成元素蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能够水解(断裂)蛋白质,也称为蛋白水解酶。蛋白水解酶在许多生理和病理过程中发挥重要作用,在食品和乳品加工业也有着广泛应用。

工作机理：

蛋白水解酶制剂能在中性条件下水解蛋白质食品中的缩氨酸键,释放氨基酸或者多肽。在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黄油和酱油生产中,添加中性蛋白酶可澄清发酵液中的雾气。酵母在发酵阶段的生长可以通过悬浮蛋白质转化的氨基酸来加以促进,从而加速发酵并提高产量；

艾美捷中性蛋白酶（Dispase®）是一种非哺乳动物来源的无（AOF）金属中性蛋白酶，通过沃辛顿开发的方法纯化。其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于原代细胞和二次（亚培养）细胞培养的制备，因为它对细胞膜温和。这种蛋白酶还用作细胞分离和组织解离应用中的二酶，通常与胶原蛋白一起使用。

中性蛋白酶（分散酶）（WBC-LS02112）组成

已知该酶每g摩尔纯化酶含有1g原子的锌。如果通过EDTA或EGTA等螯合剂去除这种锌成分，则会获得无活性的载脂酶。钙已在纯化的蛋白质中检测到，并被认为在维持结构和构型以及防止自溶方面发挥作用（Griffin ａnd Fogarty 1973 ａnd Alvarez 2006）。

分子特性

中性蛋白酶（分散酶）（WBC-LS02112）由细胞外中性蛋白酶基因npr（GenBank入库号BAA00734）产生，该基因与枯草芽孢杆菌具有62%的同一性（Koide等人，1986）。存在单个 978 bp 开放阅读框，并且序列的存在对于杆菌的所有分泌蛋白酶都是常见的。（竹川等人，1991年）。从Asn-287到Gly-590的Npr序列与中性蛋白酶序列具有相当大的同源性，例如来自热蛋白水解芽孢杆菌的热溶酶（55%相同）。

中性蛋白酶（分散酶）（WBC-LS02112）的应用

组织分解和转代培养

防止不必要的细胞聚集

培养细胞的制备

从中分离完整的表皮，从基质培养中分离完整的上皮片（Kurt等人，1989）

正常、二倍体细胞和细胞系的收获和转移（Matsumura 等人，1975 年）

温和而完整的表皮细胞分离（北野和冈田1983）