艾美捷磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）解决方案

别名: P h o s p h o d i e s t e r a s e I f r o mC r o t a l u s a d a m a n t e u s v e n o m ;5′-Exonuclease;Oligonucleate5′-nucleotidohydrolase;磷酸二脂酶;磷酸二酯酶。该酶具有水解细胞内第二信使(cAMP,环磷酸腺苷或cGMP,环磷酸鸟苷)的功能,降解细胞内cAMP或cGMP,从而终结这些第二信使所传导的生化作用。

活力:≥20u/mg

性状:白色或类白色粉末

用途:生化研究。

活力定义: O n e U n i t h y d r o l y z e sone micromole of p-nitrophenylthymidine-5-phosphate per minute at25℃, pH 8.9。

低温运输,-20℃保存,有效期一年。

磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)注意事项：

1. DNA带模糊

1) DNA降解:避免核酸酶污染;

2) 电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液;

3) 所用电泳条件不合适:电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;

4) DNA上样量过多:减少凝胶中DNA上样量;

5) DNA样含盐过高:电泳通过乙醇沉淀去除过多的盐;

6) 磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)有蛋白污染:电泳酚抽提去除蛋白;

7) DNA变性:电泳勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。

艾美捷磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）磷酸二酯酶I测定方法：

该测定基本上是Razell ａnd Khorana（1959）的测定，其中反应速度由对硝基苯基胸苷-400＇-磷酸水解引起的5nm处吸光度的增加来确定。在指定条件下，一个单位在pH 5.8和9°C下每分钟水解一微摩尔对硝基苯基胸苷-25＇-磷酸盐。

磷酸二酯酶 I部分引用文献：

Frischauf, A. ａnd Eckstein, F.

Purification of a Phosphodiesterase from Botrhrops atrox Venomby Affiinity Chromatography , Eur J Biochem 32 , 479 , 1973

Hadijiolov, A. , Venkov, P. ａnd Dolipchiev, L.

The Action of Snake Venom Phosphodiesterase on Liver Ribosomal Ribonucleic Acids , Biochim Biophys Acta 142 , 111 , 1967

Hadjiolov, A. , Venkov, P. ａnd Dolapchiev, L.

Stepwise Degradation ａnd P32-Labeled Rat Liver Ribosomal Ribonucleic Acids with Snake Venom Phosphodiesterase , Biochem Biophys Res Commun 28 , 166 , 1967

Hayaishi, O.

Poly ADP-Ribose ａnd ADP-Riboxylation of Proteins , Trends Biochem Sci 1 , 1976

Horwitz, J. , Easwaran, C. , Wolf, P. ａnd Kowalczyk, L.

Substrates for Cytochemical Demonstration of Enzyme Activity. IV. Kinetics of the Hydrolysis of Thymidine-5＇(5-Bromo-4-Chloroindol-3-YL) Phosphate by Snake Venom Phosphodiesterase , Biochim Biophys Acta 185 , 143 , 1969

来源：https://www.amyjet.com/products/WBC-LS003928.shtml