Fluorochrome（FC10000）荧光金说明书整理

荧光金的使用与其他荧光示踪剂基本相同。主要区别在于Fluoro Gold在注射后存活时间、浓度范围、组织治疗以及与其他组织化学技术的兼容性方面更为灵活。

储存和保质期：干燥的荧光金应保存在4摄氏度的不透光封闭容器中。正确储存，Fluoro Gold的保质期应超过一年。溶液中的染料也应保存在4摄氏度的不透光封闭容器中，在这种情况下，它将保持稳定至少六个月。

Vehicle：氟金可溶解在蒸馏水或0.9%盐水中，或用作0.2M中性磷酸盐缓冲液中的悬浮液。

染料浓度：氟金已在1-10%的浓度范围内成功使用。初，建议浓度为4%。如果注射部位出现不希望的坏死，或标记过于强烈，则将浓度降低至2%溶液。如果需要使用更精确的测量，氟金的分子量为532.6道尔顿。

术后生存期

在两天到两个月的时间内观察到良好的逆行标记。生存期通常为三到五天。长的存活期增强了远端突起的填充，而不会使染料从细胞中扩散。

固定

几乎可以使用任何固定剂，或者不使用固定剂；经常使用含有4%甲醛的磷酸盐中性缓冲盐水。含有高浓度重金属（如锇、汞）的固定剂会熄灭荧光，而高浓度（超过1%）的戊二醛可能会增加背景荧光。

Fluorochrome荧光金（FC10000）组织化学处理：

含氟金的组织可根据几乎任何常见的组织学技术进行处理。这包括未固定组织的冷冻切片（10µm）、固定组织的冰冻切片（20µm）和从塑料（2-4µm）或石蜡（3-10µm）中嵌入的组织切下的薄片。固定组织的冰冻切片是常用的。

组合方法

在处理的这一点上，可以进一步处理切片以获得第二标记，例如放射自显影、HRP

组织化学、免疫细胞化学、第二荧光示踪剂、荧光复染等。

安装、清理和滑盖

切片通常安装在涂有明胶的载玻片上，风干，浸入二甲苯中，并用非荧光DPX塑料安装介质覆盖。除非与第二种示踪剂不兼容，否则切片可以用分醇脱水。如果荧光金与荧光免疫细胞化学结合，则将切片风干并直接用中性缓冲甘油（1:2）覆盖。

检查和摄影

荧光金可以使用宽带紫外激发滤光片在荧光显微镜下观察。当用中性pH缓冲液处理组织时发出金色，而当用酸性（例如pH 3.3）pH缓冲液加工组织时发出蓝色。它可以用数码或胶片拍摄（彩色打印使用Ektachrome 200-400 ASA胶片，黑白打印使用同等速度的胶片，例如Tri-X）。大多数曝光时间范围为10-60，取决于物镜放大率和标签强度。三十（30）曝光约为平均值。可以利用多次曝光同时可视化荧光金和另一种示踪剂。因此，UV将与亮场照射相结合，以在放射自显影中同时定位荧光金与HRP或银颗粒。类似地，蓝光激发可以组合起来，也可以可视化FITC的绿色发射颜色，而绿色激发光可以用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭（荧光复染剂）的红色发射颜色。

Fluorochrome荧光金（FC10000）其他信息：

对于通过微量注射器或微量移液管进行的压力注射，Fluoro Gold应溶解在蒸馏水中或0.9%盐水中。氟金也可用作2M中性磷酸盐缓冲液中的悬浮液，然而，悬浮颗粒可能会堵塞细的微量移液管尖端，因此蒸馏水或0.9%盐水是选载体。对于离子电渗疗法，1%的氟金溶液在1M乙酸缓冲液（pH=3.3）中配制。清洁良好（95%ETOH，水）的玻璃微量移液管尖端应为10-20µm。佳的离子电渗参数是在10-20分钟内用脉冲电流（4-10开启，4-10关闭）输送+1至+5u安培。

实际上，任何中枢或外周神经系统结构都可以注射Fluoro Gold进行逆行转运分析。在外周神经系统中，可以研究神经节和外周目标。对于周围神经的研究，应切断或损伤神经，并浸入或注射aq。5%氟金溶液。由于Fluoro Gold不会被完整的通过纤维显著吸收，因此纤维必须被切割或严重损坏才能吸收染料。

运输和生存时间

荧光金被用作逆行轴突示踪剂，尽管确实发生了正向轴突运输。应改变存活时间（特别是12小时-2天的短存活时间），以大限度地提高所研究的特定神经元系统中的正迁移。对于逆行运输，存活时间应从4天到14天不等。大多数系统需要7到10天的时间，尽管长路径（如脊髓到脑干）和大型哺乳动物（如猫、猴子）的路径可能需要更长的生存时间（如14天）。此外，由于荧光金在逆行标记神经元内保持快速，几个月的存活时间也将产生好的结果。对于离子电渗疗法，建议2-5天的存活时间。据估计，哺乳动物每天的运输量约为2厘米；冷气球慢一点

来源：https://www.amyjet.com/products/FC10000.shtml