Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用方法

您将在一个小药瓶中收到荧光金抗体。这是一种在兔体内培养的多克隆抗体。小瓶将含有约100µl的抗体溶液。您不会收到冷冻的抗体，但应立即冷冻并储存在寒冷（-20ºC）、黑暗、干燥的环境中。一旦溶液解冻以准备工作滴定度，不要再冷冻溶液。一台好的商用冰箱的冷冻部分，没有防冻功能，应该足够了。如果适当且连续冷冻，抗体溶液可储存长达一年。

抗体溶液应保持冷冻，直到可以使用。100µl抗体等分试样的稀释度为1/100。抗体可在BSA稀释剂（50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中进一步稀释1/50000至1/100000倍，以产生50ml至100ml的工作效价。这意味着你可以将收到的溶液稀释500至1000倍。

如果您使用Vector精英套件，这将治疗300至1000个切片。制备后，抗体溶液可在凉爽（4ºC）、黑暗和干燥的环境中储存长达七天。好的商用冰箱的冰箱部分应该足够了。不建议在配制后七天内使用该溶液。

Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用：

氟金可以用几种不同的方法注射，包括压力法、离子电渗法和各种研究人员开发的其他应用。参见Schmued和Fallon，Fluoro-Gold：“一种具有众多独特财产的荧光逆行轴突示踪剂”，《大脑研究》，377（1986）147-154，以及Pieribone和Aston-Jones，“荧光金在深部脑核传入研究中的离子导入应用”，《脑研究》，475（1988）259-271。许多研究人员开发了自己的改进程序。抗体的使用不应依赖于使用荧光金的方法。

注射Fluoro Gold后，将漂浮切片（使用了灌注了4%甲醛的大鼠的30μm切片）与Fluoro金抗体溶液在4℃下孵育过夜。将切片清洗，然后在生物素化GAR（Vector Labs）中以1/1000在室温下孵育1小时，然后再次清洗。然后将切片在Avidin/Biotin（Vector Labs）中以1/1000孵育1小时，洗涤并转移至二氨基联苯胺（.04%）和氯化镍（2.5%）中的0.1M乙酸钠和0.06%H2O2中6分钟。然后清洗、安装、干燥、脱水并盖上盖子。

根据经验，如果按照上述方式储存和制备，如果您使用Vector精英试剂盒，每小瓶抗体应处理300至1000个30μm的白化大鼠脑（或类似大小的动物）切片。然而，您应该尝试集中注意力和程序，以确定哪一个适合您的环境。

荧光金(Fluoro-Gold)抗体根据不同规格分为单管和二管：

荧光金抗体-单管/100ul（FC20001）

荧光金抗体-2管/2x100ul（FC20002）

来源：https://www.amyjet.com/featured/Fluorochrome-Fluoro-Gold.shtml