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通用多巴胺 (DA) ELISA试剂盒(RDR-DA-Ge)试剂制备:
1.使用将所有试剂盒组分和样品置于室温(18-25°C)。
2.标准品-用1.0 mL标准稀释剂重新配制标准品,在室温下保持10分钟,轻轻摇动(不要泡沫)。储备溶液中标准品的浓度为1000pg/mL。准备7个含有0.2 mL标准稀释剂的试管,并根据下图所示使用稀释的标准品生产双稀释系列。在下一次转移之彻底混合每个管。准备7分的稀释系列;例如:1000 pg/mL,500 pg/mL,250 pg/mL,125 pg/mL,62.5 pg/mL,31.25 pg/mL,15.625 pg/mL,后一个带有标准稀释剂的EP管是空白的0 pg/mL。
3.检测溶液A和检测溶液B-检测溶液A和B已经处于正确的浓度,不需要进一步稀释。
4.洗涤液-用580 mL去离子水或蒸馏水稀释20 mL洗涤液浓缩液(30×)以制备600 mL洗涤液(1×)。
5.TMB底物-用无菌吸头吸取所需剂量的溶液。不要将残留的溶液倾倒回小瓶中。
注意:
1.不要直接在孔中进行连续稀释。
2.测定15分钟内准备标准品。
3.按照说明小心重构标准品,避免起泡并轻轻混合直至晶体完全溶解。
4.重组标准只能使用一次。
5.如果在洗涤液浓缩液(30×)中形成晶体,则温热至室温并轻轻混合直至晶体完全溶解。
6.试剂制备过程中使用的任何污染水或容器都会影响检测结果。
通用多巴胺 (DA) ELISA试剂盒样品制备:
1.Reddot Biotech INC.仅负责试剂盒本身,不负责测定过程中消耗的样品。用户应计算整个测定中可能使用的样品量。请提预留足够的样品。
2.请在分析预测浓度。如果这些值不在标准曲线的范围内,用户必须确定其特定实验的佳样品稀释度。样品应用0.01 mol/L PBS(pH7.0-7.2)稀释。
3.如果手册中未指明样品,则需要进行初步实验以确定试剂盒的有效性。
4.组织或细胞提取使用化学裂解缓冲液制备的样品可能由于某些化学品的影响而导致意外的ELISA结果。
5.由于来自其他来源的抗原与我们试剂盒中使用的抗体(例如,抗体靶向构象表位而不是线性表位)之间可能不匹配,我们的产品可能无法识别来自其他制造商的一些天然或重组蛋白。
6.由于细胞活力,细胞数量和/或取样时间等因素的影响,试剂盒可能无法检测到细胞培养上清液样品。
7.建议将新鲜样品用于测定。蛋白质降解和变性可能发生在样品中,并可能导致不准确或不正确的结果
来源:https://www.amyjet.com/products/RDR-DA-Ge.shtml
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