艾美捷CompTech丨人失活的补体C3b蛋白物理特性和功能

名称： iC3b

编号： A115

规格： 250 µg/vial

浓度： 1.0 mg/mL (实际浓度见分析证书)

类型 冷冻液体

纯度： >90%由SDS-PAGE

缓冲区： 10 mM磷酸钠，145 mM氯化钠，pH 7.2

消缺系数。 A280 nm在1.0 mg/mL时的=为1.03

分子量： 176000Da (3链)

防腐剂： 无，0.22µm过滤

存储： - 7 0oC或以下。避免冻融。

根源 正常人血清 (经认证的HBsAg和HCV、HIV1和HIV-II抗体检测 均为阴性) 。

预防措施 在处理人体血液制品时要采取常规的预防措施。

一般说明

iC3b (灭活的C3b) 来源于C3b。C3b向iC3b的转化几乎破坏了C3b上几乎所有的 功能结合位点。C3b本身是由所有三种补体途径(Law，S。K.A.和里德，K。B.M. (1995 ) )，当天然C3被裂解时，释放C3a。在因子H存在的因子下，因子I对C3b进行裂解制备 iC3b。当C3b在溶液中游离时，H和I的裂解迅速，当它附着在表面时，速度较慢。如果 C3b切割到iC3b，因子I的其他辅助因子也允许切割，这包括两个膜蛋白CR1 (CD35) 和 MCP (CD46) 。因子I可以在alpha链中的两个位置切割C3b，如果两个位点都被切割， 则释放一个小片段 (C3f，2000Da) 。如果C3b体附着在一个表面上，iC3b就会留在 那个表面上。本公司销售的iC3b由流体相C3b制成，不能附着在表面上。表面结合的  C3b和iC3b通过共价键与目标相连，共价键可以是酯键，也可以是酰胺键。酯键是不稳 定的，导致粒子逐渐释放。在补体激活过程中产生的大多数C3b永远不会附着在表面上 ，因为它的硫酯与形成水的流体相C3b发生反应。表面结合的iC3b及其分解产物C3d被 淋巴细胞和吞噬细胞上的许多受体识别，这些受体利用这些配体刺激吞噬作用和抗原 呈递给适应性免疫系统的细胞。iC3b的受体分别是b细胞上的CR2 (CD21) 和吞噬细胞 上的CR3 (CD11b/CD18) (Dodds，A。W.和Sim，R。B.编辑 (1997) ；莫利，B。J.和沃 尔波特，M。J. (2000)).ic3b-受体相互作用的结果之一是靶标特异性b细胞和t细胞群 体的扩大。

物理特性和结构

分子量：17.6万道尔顿， 由三个二硫键连接链组成。人的iC3b呈糖基化状态 ( ~值为2.8%) 。C3b的阿尔法启动链被因子I切割，产生两个片段 (63000和39000Da) ， 它们都与beta链 (75000Da) 相连，但没有变化。根据因子I可能存在一些异质性     (Morley，B。J.和沃尔波特，M。J. (2000) ；S。K.A.和里德，K。B.M. ( 199 5) ；多兹，A。W.和Sim，R。B.

编辑 (1997) ；摩根，B.P。ed. (2000)).如果因子I分裂两次，C3f (2000Da) 被 释放，其链约为61000、39000和75000Da。iC3b的pI约为。5.7.

功能

正如它的名字所暗示的，  “灭活的C3b”失去了C3b表达的大部分功能。C3b具 有因子B、因子P、因子H、因子I、C5、DAF (CD55) 、MCP (CD46) 和受体CR1的结合 位点，而iC3b经历了结构变化，破坏了许多这些位点(Gros，P.等。  (2008) ；多兹 ，A。W.和Sim，R。B.编辑 (1997) ；兰布里斯，J。D. (1988)).关键的是，iC3b 不能结合因子B，因此不能参与补体激活。然而，iC3b仍然可以通过结合C5参与C5转 化酶的活性，它仍然可以结合正确蛋白，它已经获得了与CR3受体相互作用的能力， 这对吞噬和t细胞带t细胞反应的抗原呈递很重要(Ghannam A等。

(2008)).

测定

目还没有针对iC3b的功能检测方法。SDS凝胶用于确定蛋白质的链结构

。

在体内

在补体激活过程中，C3b产生于C3的蛋白水解裂解。在侵袭性补体激活过程中  (在脓毒症和感染部位) 可能会形成高浓度的C3b，但大部分是液体期C3b。在血液中 ，因子H和I迅速裂解C3b形成iC3b。虽然iC3b对胰蛋白酶样酶非常敏感，但它在血浆 或血清中的寿命很长 (半衰期数小时) 。由于血浆中含有过量的蛋白酶抑制剂，因此 游离凝血酶、纤溶酶或其他活性蛋白酶很少，iC3b仍然是iC3b。然而，在血液中，人 类红细胞上的CR1受体诱导了因子I的第三次切割，从而从C3dg中释放C3c(Dodds，a。 W.和Sim，R。B.编辑 (1997) )。

参考文献

Dodds, A.W. ａnd Sim, R.B. editors (1997) Complement. A Practical Approach (ISBN

019963539) Oxford University Press, Oxford.

Ghannam A, et al. (2008) Human C3 deficiency associated with impairments in dendritic cell differentiation, memory B cells, ａnd regulatory T cells. J Immunol. 181:5158-5166.

来源：https://www.amyjet.com/products/A115.shtml