Prolytix丨Haematologic Technologies纤溶酶原方案

人纤溶酶原的结构域结构表示其中：K1-K5 = 5 个 kringle 结构域，B-CHAIN = 纤溶酶的催化结构域，箭头表示纤溶酶、弹性蛋白酶和纤溶酶原激活剂 （PA＇S） 的蛋白水解切割位点。

纤溶酶原是一种单链糖蛋白酶原，在肝脏中合成，并在血浆中以约2.4μM的浓度循环（1，2）。纤溶酶原分子含有 790 个氨基酸、24 个二硫键、无游离巯基和 5 个内部序列同源性区域，称为 kringles，介于 Lys77 和 Arg560 之间。这五个三环、三个二硫键桥的克林格尔区域与 t-PA、u-PA 和凝血酶原中的克林格尔结构域同源。纤溶酶原含有一个高亲和力（Kd=9×10-6M）和四个低亲和力（Kd=5×10-3M）赖氨酸结合位点。高亲和力结合位点位于纤溶酶原的第一kringle区域内。纤溶酶原与纤维蛋白和α2-抗纤溶酶的相互作用由这些赖氨酸结合位点介导。天然谷纤溶酶原（Mr=88，000）通过纤溶酶水解Lys77-Lys83肽键很容易转化为Lys-000-纤溶酶原（Mr=76，77）。弹性蛋白酶催化谷纤溶酶原的Val441-Val442肽键的裂解产生一种功能活性酶原，称为Val-442纤溶酶原或微纤溶酶原。

纤溶酶原向纤溶酶的转化通过多种机制发生，但都会导致纤溶酶原的Arg560-Val561肽键水解，产生两条链，它们仍然由二硫键共价连接。

天然谷纤溶酶原是通过对Castellino（3）程序的修改，利用凝胶过滤和亲和色谱法从新鲜冷冻的人血浆中制备的。葡纤溶酶原的两种碳水化合物变体（CHOI 和 CHOII）通过使用赖氨酸类似物 e-氨基己酸从赖氨酸-琼脂糖中梯度洗脱分离 （3）。纤溶酶原以 50%（体积/体积）甘油/H 2 O 形式提供，在 -20oC 下储存。纯度通过SDS-PAGE分析确定。

Prolytix（Haematologic Technologies）样品凝胶信息：

1巷 人谷纤溶酶原 （HCPG-0130） 减少

2巷 人谷纤溶酶原CHOI （HCPG-0131） 减少

3巷 人谷纤溶酶原CHOII（HCPG-0132）减少

4巷 人赖氨酸纤溶酶原 （HCPG-0133） 还原

标记物：见蓝色 +2_MOPS

5巷 人谷纤溶酶原 （HCPG-0130） 非还原

6巷 人谷氨酸原蔡 （HCPG-0131） 非红色

7巷 人谷纤溶酶原 CHOII （HCPG-0132） 非红色

8巷 人赖氨酸纤溶酶原 （HCPG-0133） 非还原

凝胶 Novex 4-12% 双三

负荷 每泳道 1 μg

缓冲区 拖把

标准 见蓝加2;肌球蛋白 （191 kDa）、磷酸化酶 B （97 kDa）、BSA （64 kDa）、谷氨酸脱氢酶 （51 kDa）、醇脱氢酶 （39 kDa）、碳酸酐酶 （28 kDa）、肌红蛋白红 （19 kDa）、溶菌酶 （14 kDa）

Prolytix（Haematologic Technologies）性能：

地方化 血浆

血浆浓度 2.4微米（人体） （4）

作用方式 酶原;丝氨酸蛋白酶纤溶酶的体

分子量 88，000 （谷纤溶酶原） （5） 83，000 （赖氨酸纤溶酶原） （5） 38，000 （谷纤溶酶原） （6）

等电点 6.2 （谷溶酶原） （1） 6.7-8.3 （赖氨酸纤溶酶原） （1）

结构 单链，24个链内二硫键，5个Kringle区域。

碳水化合物百分比 约2%

引用文献：

Robbins, K.C., Methods in Enzymology, 45, 257 (1976).

Collen, D. in Blood Coagulation, Zwaal, R.E.A. ａnd Hemker, H.C., eds., pp. 243-258, New York, Elsevier (1986).

Castellino, F.J., et al., Methods in Enzymology, 80, 365 (1981).

Wohl, R.C., et al., Thromb. Res., 27 523 (1982).

Barlow, G.H., et al., Biochemistry, 23, 2384 (1984).

Sottrup-Jensen, L., et al., in Progress in Chemical Fibrinolysis ａnd Thrombolysis, Vol. 3, ed. J.F. Davidson, 7. R.M. Rowan, M.M. Samana, P.C. Desnoyers, pp. 197-228, New York: Raven Press (1975).

Prolytix(身为Haematologic Technologies，简称haemtech）注于凝血诊断域, 主要研究参与凝血调节以及骨代谢的蛋白, 可提供高质量血浆来源的凝血蛋白，以及单克隆抗体和多克隆抗体。此外，还提供凝血因子缺乏血浆和用于临床研究的定制采血管。 艾美捷科技是Prolytix（Haematologic Technologies）的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。   

来源：https://www.amyjet.com/brand/haemtech.shtml