Prolytix玉米胰蛋白酶抑制剂 丨Haematologic Technologies方案

PT和aPTT的影响。将CTI添加到正常混合的人血浆中至各种终浓度，并在进行测定之将混合物在冰上孵育一小段时间。PT不受影响，而aPTT加倍，每毫升血浆添加约60微克CTI。

Prolytix（Haematologic Technologies）纯化的CTI玉米胰蛋白酶抑制剂（CTI

）是一种小蛋白质，位于大多数玉米种类的籽粒中。CTI 不仅是胰蛋白酶的抑制剂，而且在凝血实验中测试时也是一种特定的人因子 XIIa 抑制剂 （1-6）。该抑制剂与胰蛋白酶或因子XIIa形成一对一复合物，当添加到血浆中时，可延长活化的部分凝血活酶时间，而不影响PT测定（6）。因子XIIa的特异性使该抑制剂可用于组织因子（TF）依赖性凝血反应的分离和研究（6）。

使用CTI研究TF依赖性反应已在文献中记录（6，8-10）。研究表明，当尝试在全血或血浆样品中进行TF依赖性测定时，抑制凝血的接触途径至关重要。在样品采集点添加CTI可防止后续样品处理步骤中接触途径的激活，从而减少体外伪影。CTI常见的用途与尝试在低TF浓度下工作的凝血酶生成测定有关。HTI 的 CTI 产品针对此特定应用进行了性能测试。

该蛋白质由112个氨基酸组成，计算分子量为12，028（7）。计算出的分子量与通过纯化蛋白质的沉降平衡分析确定的分子量（12，500）非常一致（3）。CTI的氨基酸序列与其他胰蛋白酶或丝氨酸蛋白酶抑制剂的氨基酸序列的比较显示几乎没有相似之处（7）。

CTI使用已发表的程序的组合进行纯化（3，4）。为了开始纯化过程，从新鲜甜玉米的内核中提取CTI到生理缓冲液中。然后使用丙酮对提取物进行脱脂，并通过凝胶过滤和离子交换色谱法进一步纯化蛋白质。终的CTI制备在还原和非还原条件下通过SDS-PAGE分析显示为单条带。

测试CTI的制备是否能够在不影响PT测定的情况下延长aPTT测定。确定每批CTI的比活性，并将一个单位定义为使正常人血浆的aPTT翻倍所需的CTI量。

纯化的CTI在20 mM Tris，0.15 M NaCl，pH 7.4中配制，应在-20°C或更低的温度下冷冻储存。

采血管

为了简化添加CTI的样本采集过程，HTI开发了含有CTI的采血管。这些试管（我们的SCAT-27系列）允许您将血液直接抽到含有CTI的抗凝剂上，从而简化了进行TF依赖性研究的过程。您可以选择使用我们的标准CTI/柠檬酸盐配方（11mM柠檬酸盐，50 ug/mL CTI），也可以创建自己的定制配方。HTI的采血管不是无菌的，生产和销售仅供研究使用。有三种标准尺寸可供选择。

SCAT-27-4.5/5 – 5 mL 管

SCAT-27-2.7/5 – 3 mL 管

SCAT-27-1.8/5 – 2 mL 管

文献引用：

Hochstrasser, K., et al., Z. Physiol. Chem., 348, 1337 (1967).

Halim, R.K., et al., Crop. Sci., 13, 405 (1973).

Swartz, M.J., et al., J. Biol. Chem., 252, 8105 (1977).

Hojima, Y., et al., Thromb. Res., 20, 149 (1980).

Ratnoff, O.D. ａnd Moneme, V., Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 166, 297 (1981).

Rand, M.D. et al., Blood, 88, 3432 (1996).

Mahoney, W.C., et al., J. Biol. Chem., 259, 8412 (1984).

Cawthern KM., et al., Blood. 1998;91:4581-4592.

Dargaud Y, et al., Journal of Thrombosis ａnd Haemostasis. 2006;4:1160-1161.

Mann K.G., et al., J Thromb Haemost. 2007;5:2055-2061.

艾美捷科技是Prolytix（Haematologic Technologies）的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。   

来源：https://www.amyjet.com/brand/haemtech.shtml