BOEHRINGER   MANNHEIM      r-biopharm

D-葡萄糖/D-果糖测定试剂盒（酶学试剂盒）

Cat. No.: 10139106035规格：27次检测

1. 紫外分光光度检测：

用于检测食品中的D-葡萄糖、D-果糖，例如：啤酒、一般的饮料（软饮料和柠檬汁）、面包类食品、、乳制品（例甜点、含水果产品的奶制品）、水果和蔬菜（例马铃薯）及相关产品（果汁、果酱、番茄浆、番茄酱）、蜂蜜、冰淇淋、糖果类产品、果酒。也可用于化妆品、药品（注射用液体）、纸板、烟草、生物样品的相关检测。（D-葡萄糖及D-果糖的检测通常与蔗糖的检测一起进行，详情请参考相关试剂盒。）

2．被检测物：

D-葡萄糖在动植物界广泛存在。它是碳水化合物新陈代谢过程的必备成分且通常以游离形式与D-果糖和蔗糖共存。但更重要的存在形式是二-,三-,寡-和多糖（乳糖、麦芽糖、蔗糖；棉籽糖；糊精；淀粉；纤维素）。在食品检测、生物化学、临床化学中D-葡萄糖检测是非常重要的，且常与其它糖（碳水化合物）的检测一起进行。

多数情况下植物中存在游离的D-果糖，它是一种非常重要的糖成分（如水果）。D-果糖是二-，三-，寡糖（蔗糖、乳糖；棉籽糖；寡-b-果聚糖）及菊糖的成分。D-果糖是糖尿病患者食品中糖的替代品，它比蔗糖要甜，且造成的牙菌斑比蔗糖要少。

在食品检测中D-葡萄糖和D-果糖的数量和比例都是人们感兴趣的项目（如掺假检测）。

3．原理：

D－葡萄糖（D-果糖）＋ATP－己糖激酶－>葡萄糖-6-磷酸（果糖-6-磷酸）+ADPX

葡萄糖-6-磷酸+NADP+—葡萄糖-6-磷酸-脱氢酶—>D-葡萄糖酸盐-6-P+NADPH+H+X

4．特异性：

D-葡萄糖和D-果糖检测是特异性的。

5．灵敏度及检测限：

检测灵敏度为0.005个吸光单位,样品体积为V=2.000ml。若在340nm下检测，此时的D－葡萄糖+D-果糖浓度为0.2mg/l样品溶液。0.4mg/l的检测限是由0.010（340nm）的光吸收区分度而来,最大样品体积为2.000ml。

6．线性：

检测线范围从1ugD-果糖＋D－葡萄糖/检测（0.4mgD-果糖＋D－葡萄糖/l样品溶液; V=2.000ml）到100ug D-果糖＋D－葡萄糖/检测（1gD-果糖＋D－葡萄糖/l样品溶液；V＝0.100ml）。

7．精  度：

用一个样品溶液进行重复时，可能会产生0.005~0.010个吸光单位的差异。

在测量范围内相对标准偏差（变化系数）约为1～2％。

果汁检测（参考2.7）：

D-葡萄糖：

r=0.42+0.027?（C D-葡萄糖g/l）g/l

R=1.0+0.042? （C D-葡萄糖g/l）g/l

D-果 糖：

r=0.15+0.033?（C D-果糖g/l）g/l

R=1.05+0.045? （C D-果糖g/l）g/l

儿童食用面包干检测：

D—葡萄糖：  x=5.5g/100g

r=0.238g/100g; s（r）=?0.084g/100g

R=0.359g/100g; s（R）=?0.127g/100

D－果  糖： x=7.0g/100g

r=0.313g/100g; s（r）=?0.111g/100g

              R=0.511g/100g; s（R）=?0.181g/100g

果酒检测：

r=0.056?xi； R=0.12+0.076?xi

xi=C  D-葡萄糖及D-果糖 g/l

8． 试剂盒内容物：

1． 三乙醇胺缓冲液，PH约7.6；NADP,约64mg; ATP约160mg。

2． HK（己糖激酶），约200U； G-6P-DH（葡萄糖－6－磷酸－脱氢酶），约100U。

3． PGI（磷酸－葡萄糖－异构酶），约490U。

4． 检测质控用D－葡萄糖标准样（对计算结果而言，标准样的测定不是必须的）。

9． 试  剂：

D－葡萄糖、D－果糖检测中使用的试剂对人无毒害，但仍要遵守所有化学试剂都要遵守的一般安全规则。使用过的试剂放入实验室垃圾桶，如有需要在保留。

10. 样品制备：

1）.直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）.过滤混浊溶液。

3）.除去样品中的CO2（通过过滤）。

4）.通过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5）.调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6）.用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7）.用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8）.压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9）.用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。