标题毛细管电色谱在要骗你分析中的使用

毛细管电色谱是近10年来综合了现代最新分离技术高效液相色谱和毛细管电泳的优势而发展起来的高效电分离微柱液相色谱技术。CEC一般采用熔融石英毛细管，在柱内填充或在柱壁键合固定相，用高压直流电源（或加一定的压力）代替高压泵，即用电渗流驱动流动相，溶质依据它们在流动相与固定相中的分配系数的不同和自身电泳淌度的差异得到分离，既能分离中性物质又能分析带电组分。因此，可将它定义为“一种溶质与固定相间的相互作用占主导地位的电泳过程”。CEC是HPLC和CE的有机结合，不仅具有CE水平的高柱效，同时还具有HPLC的选择性。它克服了CE选择性差和分离中性物质的困难，同时大大提高了液相色谱的分离效率，开辟了高效微分离技术的新途径。近年来，随着CEC柱制备技术、分离机制、仪器设备的不断研究和发展，CEC已在分析领域中引起广泛关注，并在有机小分子分离、环境分析、药物分析和生化分析等方面得到应用。本文就CEC的基本原理、研究进展及其在药物分析中的应用作一概述。
目前CEC主要用于包括多环芳烃在内的芳香族化合物、染料、蛋白、肽、寡聚核苷酸、氨基酸、对映体等，在药物分析中的应用逐渐增加。对于疏水性强的样品或电泳淌度相近的离子化合物、对映体，CEC体现出强大的分离能力，并在分析速度、重现性、检测限、定量方面达到了应用的要求。

　　5.1手性分离CEC进行手性药物对映体拆分主要有3种方式:（1）非手性固定相结合手性添加剂流动相，手性选择作用依靠流动相中添加的手性选择剂产生。（2）手性固定相,固定相上键合手性选择剂，如环糊精、蛋白等。（3）手性分子烙印固定相。进行记忆性、专一性手性分离。Mayer等在50μm开管柱内壁涂布键合了γ-CD或β-CD的二甲基聚硅氧烷，在中性条件下，较好地分离了NSAIDs（布洛芬、氟联苯丙酸、芴丙酸、乙哚乙酸）和1-苯乙醇的对映体。用填充法分别制备3μmODS普通电色谱柱和5μm键合HP-β-CD的硅胶颗粒手性电色谱柱，进行了手性固定相和非手性固定相手性分离的比较，在拆分氯噻酮时，手性固定相方式显示出分离时间短、高选择性和高分辨率的优势。另外，Li等用β-CD手性固定相拆分了环己巴比妥、安息香、脱氧核糖蛋白（DNP）-蛋氨酸、DNP-乙硫氨酸和DNP-正亮氨酸的对映体。用键合α1-酸性糖蛋白的手性固定相电色谱柱分离了环己巴比妥、安息香、戊巴比妥、异环磷酰胺、环磷酰胺、双异丙吡胺、美多心安、心得安、心得平和心得舒，并考察了pH、电解质浓度、有机溶剂浓度对保留和手性选择性的影响。在固定相上键合了人血清白蛋白，拆分了安息香、羟基安定。最近，分子烙印技术已开始引用于手性分离，Schweitz等在毛细管柱内填充含有功能性单体、交联剂、烙印分子（如R-心得安、S-美多心安）的聚合物，使其具有单一的记忆特性，可用于相应手性药物的快速分离，如在120s内可使心得安、美多心安对映体达到基线分离。

　　5.2复杂成分分析复杂成分分析，特别是分子结构相近或电泳淌度接近的混合成分的分离是比较困难，也是非常重要的。近年来CEC在这方面展示了良好的应用前景，利用梯度洗脱电色谱较好地分析了生物体液中皮质醇类化合物，在加电压的同时施加1.2MPa气压，实施加压电色谱并梯度洗脱，生物体液中肾上腺甾酮、氢化可的松、地塞米松、氟考龙等能在较短时间内很好地分离，当样品预处理后，连续进样200次都能获得良好的分析结果。同样地，利用梯度洗脱电色谱结合电喷雾离子质谱检测，分离了苯二氮类（安定、硝基安定）、皮质醇类（去炎松、氢化可的松、泼尼松、可的松、甲强龙、倍他米松、地塞米松、肾上腺甾酮、氟考龙、丙米松）和噻嗪类利尿剂（甲苯喹唑酮、氟硫噻嗪、双氢氟噻嗪、苄氟噻嗪、甲氯噻嗪）等药物。

　　先用ODS反相电色谱柱分析了甾类化合物Fluticasonepropionate及其含有的杂质，在提高流动相pH和有机溶剂乙腈浓度后，分析时间明显缩短，并在相近的条件下分析了前列腺素以及合成的中间体和其它杂质，还较好地分离了头孢氨呋肟的非对映异构体。为了更好地分离强极性或带电组分，达到快速高效，用强阳离子交换树脂替代ODS填料，对三环类抗抑郁剂（丙咪嗪、阿米替林、去甲丙咪嗪、去甲替林、甲吡咯嗪、氯丙嗪、苄氟噻嗪）进行分析，获得8×106.m-1理论塔板数，并有效地改善了峰形。采用加压电色谱，15min内分离了抗癫痫药物及其代谢物（ethosuccinimid、扑痫酮、环氧卡马西平、10,11-二羟卡马西平、苯妥英、卡马西平），10min内分离了β-受体激动剂（特布他林、酚丙喘宁、克喘素），还考察了电压、附加压力大小对分离效率和保留时间的影响。作者认为，在加压下可以降低流动相pH，不需要过多考虑电渗流的损失。全面考察了电色谱系统的电压、温控、样品进样量、有机溶剂等因素对药物分析的影响，较好地分离了tipredane的非对映异构体，并有很好的重现性，可以达到定量分析的要求。

　　最近，采用梯度电色谱柱结合电喷雾离子质谱检测，分析了异羟洋地黄毒苷元、羟基洋地黄毒苷元、华蟾蜍它灵、洋地黄毒苷元、华蟾蜍精、蟾蜍灵等甾类化合物。魏伟等［27］用离子交换电色谱分离盐酸巴马汀、盐酸药根碱、盐酸小檗碱等生物碱类成分，尝试用CEC分离中药复杂成分人参皂苷，开始了CEC在中药复杂成分分析中的应用研究。

转载自：www.shunstar.cn