标题食品中农药残留的检测方法

1） 免疫检测技术用于农药残留的免疫检测技术有放射免疫分析（RIA）和酶免疫分析（EIA）两种。两种技术基本原理相同，即抗原与抗体反应形成抗原抗体复合物。RIA技术以放射性同位素作指示剂，然后用γ射线探测仪或闪烁计数器测定γ射线或β射线的放射强度。而在EIA技术中，用生物酶作标记物。酶与底物发生特异性反应，生成的产物与另一种物质产生颜色反应或使紫外吸光值发生改变，用分光光度计测定底物液吸光值变化推算出被测物浓度。RIA由于使用放射性物质，检测设备昂贵且需要防辐射设备，并且需要专业技术人员操作，应用前景受到一定限制。EIA技术相对RIA技术具有灵敏度高，特异性强，成本低，简便快捷，自动化程度高，检测方法多样并且安全等优点。EIA技术，尤其是酶联免疫吸附技术（ELISA），已成为目前使用最普及的免疫分析技术。我国20世纪90年代开始农药免疫检测技术研究，主要是ELISA方法。目前我国学者在这领域仍处于摸索阶段，在分子农药与载体蛋白的联结，抗体的制备，ELISA检测条件摸索和试剂盒研制等方面与国外比还有很大差距。目前国外已研制出几十种农药的酶免检测试剂盒，包括有机磷、氨基甲酸酯类、硫化氨基甲酸酯、有机氯类、三嗪类、拟除虫菊酯类及酰胺类等。

（2） 酶化学法20世纪90年代，我国学者将医学检验血液中胆碱酯酶检测原理应用于农药残留快速检测。目前有速测卡法和酶抑制率法。酶化学法优点是投资少，速度快，操作简便。其缺点是定量不够准确，只能测出总量，不能检出具体农药品种。因此酶化学法适用于批发市场筛选抽查，生产基地自查，也适用于大型仪器检出前粗选。我国蔬菜、水果不得检出的农药品种，几乎都是高毒、高残留的有机磷类、氨基甲酸酯类杀虫剂。因此酶化学法对快速检测蔬菜、水果中农药残留，初步判断其质量安全状况，防止因食用蔬菜、水果而发生农药急性中毒具有一定意义。2001年农药残留速测卡法和酶抑制率法被制定为国家标准推荐方法。
a、 速测卡法基本原理：胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯水解为乙酸与靛酚（呈蓝色），而有机磷、氨基甲酸酯类农药可抑制胆碱酯酶的活性，使催化水解，变色过程发生改变。由此推断蔬菜中是否含此类农药。检测：选取有代表性样品，剪切成1cm见方碎片。取5g放入带盖瓶中，加入10ml缓冲液，振摇50次，静置2min，取速测卡，白色要片沾取提取液，放置10min以上，将卡对折，用手捏3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。白色药片不变色或略有蓝色，均为阳性，变为深蓝或与空白对照卡相同为阴性。b、 酶抑制率法（分光光度法）基本原理：胆碱酯酶可使乙酰胆碱水解生成胆碱和乙酸，水解产物与显色指示剂作用使溶液显色。有机磷及氨基甲酸酯类农药可以抑制胆碱酯酶活性。如果胆碱酯酶活性被完全抑制则不能使乙酰胆碱水解，不能与显色剂作用，溶液为无色；如果活性部分被抑制，乙酰胆碱部分，溶液颜色比空白溶液浅。用分光光度计在一定波长下测定其吸光度的变化算出酶抑制率，从而推算出农药残留含量。抑制率用式（1）表示：I =（A0-At）/A0×100％
（1） 式中： I —— 抑制率；A0 —— 正常值（空白值）吸光度；At —— 样品溶液吸光度。目前采用的酶有乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶。底物有乙酰胆碱、丁酰胆碱、氯代乙酰胆碱及硫代乙酰胆碱等，显色剂一般采用5，5’－二硫代双（2－硝基苯甲酸）。2. 气象色谱法（GC）气象色谱法具有选择性高，分离效果好，高灵敏度等优点，是目前采用最多的方法，约占文献报道检测方法70％以上。我国农残检测方法标准80％以上为气相法，气相色谱用于农药残留分析的检测器主要有ECD、NPD、FPD等，色谱柱大多采用毛细管柱，检测农药类别有有机氯、有机磷、拟除虫菊酯及氨基甲酸酯等。
3. 高效液相色谱法（HPLC）主要用于热稳定性差，气化困难的农药残留检测，如除虫脲、灭幼脲等。由于紫外检测器与气象色谱检测器相比灵敏度低，主要用于少量氨基甲酸酯类农药残留检测，如西维因等。荧光检测器灵敏度虽有提高，但样品需采用衍生化技术，样品处理繁琐，时间较长，且成本较高，适用农药品种较少。4. 食品中农药残留快速检测技术农药多残留快速检测技术是指一次样品处理采用一种或多种类型仪器同时进行几十种，甚至上百种农药残留检测。我国20世纪90年代末由农业部环保所引进美国农药多残留快速扫描检测技术（MRSM）并结合中国国情进行了改进。该技术具有操作简单，节省溶剂，检测速度快，检测灵敏度高等优点，检测农药品种多达200余种。使用检测设备为2台气象色谱仪，1台高效液相色谱仪。其气相色谱仪采用双FPD和双ECD检测器及极性不同的双柱同时测定，定量更准确，定性更可靠。目前，水果蔬菜中446种农药多残留测定方法和动物组织中437种农药残留测定方法已采用作国家推荐性方法标准。上述标准方法均采用气象色谱－质谱联用技术及液相色谱－串联质谱技术。